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[目 的]研究垂体肿瘤转化基因1(Pituitary tumor-transforming gene 1,PTTG1)对放射后肺腺癌H1299细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并通过跨膜蛋白转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)的变化探讨其发生机制。[方 法]①构建稳定转染细胞株:将三条不同干扰序列的慢病毒载体Lv-shPTTG1转染入肺腺癌H1299细胞,沉默PTTG1基因,qRT-PCR和Western Blot检测PTTG1干扰效率筛选出干扰效率最佳的序列,建立稳定转染H1299P-细胞株,同时建立非特异性序列H1299阴性对照细胞株(H1299NC);②利用CCK-8法检测敲低PTTG1的H1299细胞在不同剂量X线(0Gy、4Gy、8Gy)照射后48小时的增殖能力;③Transwell实验检测沉默PTTG1表达的H1299细胞在不同剂量X线(0Gy、4Gy、8Gy)照射后48小时的细胞侵袭和迁移能力;④利用qRT-PCR和Western Blot实验检测下调PTTG1表达后的H1299细胞在不同剂量X线(0Gy、4Gy、8Gy)照射后48小时的相关基因和蛋白的表达情况,包括PTTG1、TGF-β1、以及上皮-间质转化标记物N-Cadherin和MMP-9。[结 果]①慢病毒载体Lv-shPTTG1转染入肺腺癌H1299细胞,荧光显微镜观察PTTG1 阳性率达到90%以上,利用qRT-PCR和Western Blot检测PTTG1干扰效率并筛选出干扰效率最佳的序列,成功构建稳定转染的H1299P-细胞株,并同时建立非特异性序列H1299阴性对照细胞株(H1299NC);②通过CCK-8法检测细胞的增殖能力:(1)放射可以减弱H1299细胞的增殖能力;(2)下调PTTG1表达对H1299细胞的增殖能力没有明显影响;(3)抑制PTTG1表达可以减弱H1299细胞在不同剂量X线(4Gy、8Gy)照射后48小时的增殖能力;③通过Transwell实验检测细胞的侵袭和迁移能力:抑制PTTG1表达既可以减弱H1299细胞的侵袭和迁移能力,也能进一步减弱不同剂量X线(4Gy、8Gy)照射后的侵袭和迁移能力;④通过qRT-PCR和Western Blot实验检测H1299细胞在不同剂量X线(0Gy、4Gy、8Gy)照射后48小时相关基因和蛋白的表达情况,qRT-PCR数据显示:相比较于0Gy(未照射),H1299细胞中PTTG1、TGF-β1、N-Cadherin基因的表达在4Gy照射后出现了下降,在8Gy照射后PTTG1、TGF-β1、N-Cadherin、MMP-9均出现了明显下降;敲低H1299细胞中PTTG1表达不仅可以下调TGF-β1表达,还能降低N-Cadherin和MMP-9表达,当转染组细胞经过4Gy照射后PTTG1和TGF-β1基因表达出现了下降,8Gy照射后PTTG1、TGF-β1、N-Cadherin、MMP-9均出现了明显下降。Western Blot数据显示:相比较于0Gy(未照射),H1299细胞在4Gy和8Gy照射后TGF-β1、N-Cadherin和MMP-9的蛋白表达均出现了下降;敲低H1299细胞中PTTG1表达不仅可以下调TGF-β1蛋白表达,还能降低N-Cadherin和MMP-9蛋白表达,当转染组细胞经过4Gy照射后PTTG1、TGF-β1 和 N-Cadherin 表达出现 了下调,在 8Gy 照射后 PTTG1、TGF-β1、N-Cadherin和MMP-9蛋白表达均出现了下降。[结 论](1)沉默H1299细胞中PTTG1的表达,既可以减弱H1299细胞的侵袭和迁移能力,还会减弱H1299细胞不同剂量X线(4Gy、8Gy)照射后48小时的增殖、侵袭和迁移能力;(2)PTTG1影响放射后肺腺癌H1299细胞的增殖、侵袭和迁移的能力可能与TGF-β1的变化有关。