体外磁场定向迁移的间充质干细胞对脊髓损伤的治疗和GAP-43表达的影响

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目的:探讨体外磁场定向迁移尾静脉注射的SPIO标记的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠脊髓损伤治疗的影响以及对脊髓组织中GAP-43表达的影响。方法:①全骨髓培养法获取SD大鼠骨髓中的BMSCs,流式细胞仪检测其免疫标记物CD29、CD45、CD54的表达。②超顺磁氧化铁颗粒(SPIO)标记BMSCs,普鲁士兰染色测定SPIO标记率。③台盼兰染色检测标记细胞存活率,CCK-8检测标记细胞分裂增殖能力。④建立大鼠脊髓损伤(SCI)模型,尾静脉注射移植细胞。⑤细胞移植后3d、7d,分别对大鼠进行BBB评分,普鲁士蓝染色观察脊髓组织内标记细胞含量。⑥TTC染色观察脊髓缺血损伤面积,Western Blot检测损伤脊髓内GAP-43表达情况。结果:①在体外,通过分离、培养、传代,能成功获得较稳定的BMSCs,且流式细胞仪检测表达间充质干细胞标记物CD29、CD54,不表达造血干细胞标记物CD45。②普鲁士蓝染色显示SPIO标记BMSCs成功率接近100%。③台盼兰染色显示SPIO标记细胞生存率与对照组无差异。CCK-8检测磁场下标记细胞增殖活性不受影响。④磁铁组大鼠BBB评分明显优于对照组。普鲁士蓝染色观察磁铁组脊髓组织中BMSCs明显多于无磁场组。⑤TTC染色显示磁铁组缺血面积小于无磁铁组。Western Blot检测脊髓组织中同一时间点GAP-43表达,磁场组明显大于对照组及无磁场组。结论:①SPIO可以有效地标记BMSCs,且对其生存、增殖没有负面影响。②外置磁场可以定向更多SPIO标记的BMSCs到达脊髓损伤处,使其更好地发挥修复作用且上调GAP-43的表达,利于脊髓损伤的恢复。
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