桑瓜饮干预2型糖尿病大鼠的作用及其PI3K/Akt信号通路机制研究

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研究目的通过研究桑瓜饮(Sangguayin,SGY)对2型糖尿病大鼠的血糖、血脂、组织病理、氧化应激指标、肝脏PI3K/Akt信号通路的影响,以期探讨桑瓜饮对2型糖尿病大鼠的干预作用及对PI3K/Akt信号通路的影响,为该方治疗2型糖尿病提供科学依据。研究方法以高脂高糖饲料及小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导,建立2型糖尿病大鼠模型。将大鼠分为四组,即正常对照组(给予生理盐水剂量:3ml/kg b.w.)、模型对照组(给予生理盐水剂量:3ml/kg b.w.)、二甲双胍组(给予二甲双胍剂量:150mg/kg b.w.)、桑瓜饮组(给予桑瓜饮剂量:1240mg/kg b.w.)。灌胃给予相应的药物或生理盐水42d,每日1次。给药第35d,进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)。给药第42d处死大鼠,检测空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(FINS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肝糖原、糖化血红蛋白(GHb)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。进行胰腺、肾脏及肝脏组织HE染色切片病理学分析。用实时定量荧光PCR(Real-time PCR)法检测大鼠肝脏组织胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)的mRNA表达情况。蛋白质印迹法(Western blot,WB)检测肝脏组织InsR、IRS-2、PI3K、Akt、p-Akt和GLUT-4蛋白表达。研究结果糖代谢指标:较模型对照组,桑瓜饮组的FBG、FINS、HOMA-IR与OGTT值均显著减少(P<0.05或P<0.01)。生化指标:相比于模型对照组,桑瓜饮组血清TC、TG、LDL-C、GHb水平明显减少,HDL-C与肝糖原水平明显增加(P<0.05或P<0.01)。HE染色病理切片:相比于模型对照组,桑瓜饮组的胰腺、肝脏及肾脏组织病理改变明显减轻。氧化应激指标:较模型对照组,桑瓜饮组MDA含量显著减少(P<0.01),SOD、CAT与GSH-Px活性明显增加(P<0.05或P<0.01)。PI3K/Akt信号通路:较模型对照组,桑瓜饮组大鼠肝脏组织InsR、IRS-2、PI3K、Akt、GLUT-4的mRNA及InsR、IRS-2、PI3K、Akt、p-Akt、GLUT-4的蛋白表达量显著上调(P<0.05)。研究结论1.桑瓜饮能降低2型糖尿病大鼠血糖,改善糖代谢,提高胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗。2.桑瓜饮可以调节2型糖尿病大鼠血脂水平,改善脂代谢。3.桑瓜饮能够减少2型糖尿病大鼠胰岛β细胞的损伤,减轻肝脏、胰腺和肾脏组织的病变,对胰腺、肝脏及肾脏组织起到一定的保护作用。4.桑瓜饮可提高2型糖尿病大鼠抗氧化应激能力,改善氧化应激状态。5.桑瓜饮能上调2型糖尿病大鼠肝脏组织PI3K/Akt信号通路中的关键分子(InsR、IRS-2、PI3K、Akt、p-Akt和GLUT-4)的mRNA及蛋白表达,可能是其发挥抗2型糖尿病作用的内在分子机制。
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