目的:急性肾损伤是临床常见的急危重症,死亡率高,临床以对症处理和肾脏替代治疗为主。肾衰康灌肠液是目前以急性肾损伤为适应症的唯一上市应用的中成药,具有确切的临床疗效。本研究旨在明确肾衰康灌肠液治疗急性肾损伤的作用机制,提高急性肾损伤的临床治疗效果。方法:1.采用网络药理学方法,利用中药药理和生物信息学数据库(TCMSP、OMIM、TTD、GAD、PharmGkb、Uniprot、DiGSeE、DAVID、Omicshare等数据库),分别挖掘肾衰康灌肠液作用靶点和急性肾损伤相关靶点,通过构建蛋白质相互作用网络和网络分析,筛选肾衰康灌肠液治疗急性肾损伤的核心靶点;通过对核心靶点的富集分析,预测肾衰康灌肠液治疗急性肾损伤的机制。2.根据网络预测结果,通过分子生物学方法(CFSE/PI染色、RT-PCR、Western blot法),肾衰康灌肠液治疗急性肾损伤的分子机制。结果:1.根据网络药理学方法预测:肾衰康灌肠液主要通过调控凋亡治疗急性肾损伤,其调控凋亡的机制与内质网应激密切相关。2.药理实验验证发现:与对照组比较,缺氧复氧模型组GRP78、Bax、Caspase-3表达升高,缺氧复氧能够导致肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡和内质网应激;与模型组比较,肾衰康组GRP78、Bax、Caspase-3表达降低,说明肾衰康灌肠液能够抑制HK-2细胞凋亡和内质网应激;与对照组比较,缺氧复氧能够激活内质网下游通路,上调CHOP、ERO1-α的表达;与模型组比较,肾衰康灌肠液能够下调CHOP、ERO1-α的表达。提示肾衰康灌肠液通过抑制HK-2细胞凋亡的机制,与CHOP-ERO1α通路密切相关。结论:通过网络药理学和分子生物学方法均表明,肾衰康灌肠液能够有效治疗急性肾损伤,其主要机制与调控内质网应激抑制和凋亡有关。肾衰康灌肠液通过调控CHOP-ERO1α通路抑制肾小管上皮细胞凋亡,是其治疗急性肾损伤的分子机制。