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研究课题鱼腥草治疗孕妇巨细胞病毒感染的临床及实验研究。研究目的探讨中药鱼腥草治疗人巨细胞病毒(HCMV)感染的疗效。运用高效液相色谱法(HPLC法)测定临床治疗孕妇巨细胞病毒感染的鱼腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量。研究鱼腥草抗病毒有效成分槲皮素体外抗人巨细胞病毒(HCMV)的作用及其作用机制。研究设计选用2007年12月—2009年6月,华中科技大学同济医学院附属中西医结合医院(武汉市第一医院)妇产科门诊孕妇1900例进行筛查,检测血清中人巨细胞病毒HCMV-IgG、IgM,发现HCMV-IgM阳性者60例作为研究对象。分组给予鱼腥草煎剂及金叶败毒颗粒进行治疗14天后,复查HCMV-IgM转阴率。运用高效液相色谱仪测定鱼腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量,并采用细胞培养实验方法研究槲皮素体外抗人巨细胞病毒(HCMV)的作用及其作用机制。治疗和观察方法1.将HCMV-IgM阳性者60例按随机数字表法分组：对照组30例,治疗组30例。对照组用金叶败毒颗粒(武汉中联药业集团股份有限公司生产,组成：大青叶、蒲公英、金银花、鱼腥草,每袋10g)治疗,每日3次,每次1袋；治疗组用鱼腥草草药30g,由武汉市第一医院煎药室统一煎制而成,每袋200m1.一次口服一袋,每日两次,均服用14天。停药1周后无菌抽取肘静脉血4 m1,取血清于-20℃保存,复查HCMV-IgM转阴率。2.观察各治疗组治疗后HCMV-IgM阳性转阴率,采用ELISA法检测,试剂HCMV-IgG、IgM, ELISA试剂盒购自美国Hope公司。3. HPLC法测定鱼腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量：采用Agilent ZORBAX ODS色谱柱,以甲醇-0.4%磷酸(52：48)为流动相；368nm波长处检测,流速：1.0ml·min-1,柱温：30℃。4.用鱼腥草抗病毒有效成分槲皮素配成不同浓度的溶液,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞毒性,槲皮素不同浓度溶液分别作用于被HCMV感染的细胞,通过观察细胞病变效应(CPE), MTT法检测细胞存活率来探讨槲皮素对HCMV感染的细胞治疗作用、对HCMV在细胞内增殖的抑制作用及预防作用,从而对其抗病毒机制进行研究。统计学方法临床观察计量资料数据均输入SPSS 13.0软件作t检验及x2检验。细胞培养实验数据以均数±标准差表示,采用SPSS13.0统计软件分析。结果1.对照组用药前后HCMV-IgM转阴率73.3%,P<0.01,差异有统计学意义。治疗组用药前后HCMV-IgM转阴率70.0%,P<0.01,差异有统计学意义。治疗组与对照组相比较,u=0.2837,P>0.05,差异无显著性。2. HPLC法测定鱼腥草抗病毒有效成分槲皮素的含量：线性范围为0.24—1.20μg,相关系数r=0.9973,平均回收率为98.75%,RSD=0.66%。3.槲皮素的半数中毒浓度为{TC50}4.75mg/ml,对HCMV在细胞内增殖的治疗作用及预防作用的半数有效浓度{EC50}分别为0.30 mg/ml和0.25mg/ml,治疗指数为{TI}15.83。结论孕妇感染巨细胞病毒后自然转阴率大约在40%左右,这将会导致胎儿宫内和经产道感染巨细胞病毒,造成孕妇流产、早产,胎儿畸形及出生缺陷等严重后果。中药鱼腥草治疗孕产妇人巨细胞病毒感染疗效显著,对感染者HCMV-IgM转阴率明显提高,且对孕妇及胎儿毒副作用小,值得临床推广应用。鱼腥草抗病毒有效成分槲皮素能明显抑制人巨细胞病毒感染引起的细胞病变效应,CPE抑制率随着药物浓度的增加而提高。