杀光肩星天牛Anoplophra glabripennis (Motsch.) Bt菌株的筛选及其杀虫基因的克隆

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong475
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文通过室内用榆蓝叶甲Pyrrhalta aenescens(Fairmaire)初步筛选出对鞘翅目昆虫有毒杀作用的Bt886、Bt.BC-1、Bt.t、Bt.tlow四株苏云金芽孢杆菌(eacillus thuringiensis,Bt)菌株,然后对这四株Bt用室内人工饲养的2-3龄光肩星天牛Anoplophra glabripennis(Motsch.)幼虫作生物测定。结果表明:Bt886,Bt.BC-1,Bt.t三菌株有效,幼虫死亡率分别为60%、60%、80%,体重比分别为0.615、0.645、0.741。其中Bt886对天牛生长发育有明显的抑制作用,即使60天后没有死亡,但已不能正常取食生长。Bt.tlow菌株对光肩星天牛无毒杀作用。 利用设计的引物从上述3菌株质粒DNA上扩增出0.819kb片断。纯化测序后,与发表的cry3Aa核苷酸序列比较,结果表明BT.BC-1,Bt.T与已发表Cry3Aa的核苷酸序列完全相同,Bt886的核苷酸序列与其它Cry3Aa有一个碱基不同。 用以Bt886质粒DNA为模板所扩增出的819bp片段作为探针,与其用HindⅢ酶切产物进行了Southern杂交,结果只在3.0kb左右处有一阳性带,表明3.0kb的杂交带中可能含有全长Cry3Aa基因,而且在质粒DNA上只有一个拷贝的Cry3Aa基因存在。 用PCR的方法进行Cry3Aa全基因扩增,结果扩增出预期的2.0kb左右的PCR产物。PCR产物进一步克隆成功后,部分测序结果表明,与报道的Cry3Aa序列同源。该基因处于进一步鉴定中。
其他文献
叨客,就是一种随时记录使用者状态和心情的工具,一种迷你博客。这项去年夏天刚刚诞生的技术服务如今已经红透了硅谷。    叨客,克隆自美国的Twitter,目前业内有人音译其为推客。Twitter的意思是“(激动地或紧张地)唧唧喳喳地说话”,也就是“唠叨”,或者“碎碎念”。从这个层面来看,叨客的称呼似乎更加贴切。今年5月,中国互联网中出现了Twitter的模仿者,而搜狐和腾讯两大门户网站也相继开始对类
期刊
1997—2001年间,从湖北、湖南、江西、浙江、安徽、黑龙江、河南、江苏、陕西、四川、河北、上海等省市共采集赤霉病穗标样600多个,分离纯化得到357株单孢菌株,经鉴定分别属于镰