论文部分内容阅读
蓝藻是地球上最早出现的能进行光合作用的原核生物。集胞藻(Snechocystissp.)PCC6803是一种单细胞蓝藻，既可以自养生长，也可以利用葡萄糖异养生长，是蓝藻分子遗传学研究中的重要模式之一。集胞藻6803的膜系统包括外膜、质膜、类囊体膜，其膜脂的合成都是从对G3P(sn-甘油-3-磷酸)的两步脂酰化开始的。原核生物的sn-1位脂酰化反应由PlsB(即GPAT，sn-甘油-3-磷酸脂酰转移酶)或者PlsX(磷酸转移酶)和PlsY(酰基转移酶)蛋白协同催化完成，sn-2位脂酰化反应由PlsC(即LPAAT，溶血磷脂酸脂酰转移酶)催化。本研究的主要目的就是在集胞藻6803中鉴定与膜脂合成过程相关的基因，并实现对它们的调控。研究内容和结果如下：
1.通过集胞藻6803基因组文库互补E.coli膜脂合成突变株BB13(plsB-plsX-)，筛选到了与膜脂合成有关的重要基因slr1510。slr1510与plsX相似，编码G3Psn-1位脂酰化反应中的一个磷酸转移酶。免疫印迹检测显示PlsX位于蓝藻总膜内。
2.利用一个受铜离子调控的启动子PpetE来调控slr1510的表达。结果发现，在关闭slr1510表达的情况下，藻细胞的生长和各项生理指标受到了严重的影响，表现为：色素含量明显减少，类囊体膜结构破坏，光合放氧能力消失，呼吸作用大大降低，蛋白质发生降解。这些结果支持slr1510在膜脂合成过程起重要作用。