银耳（Tremella fucifomisBerk），又称白木耳，为真菌类银耳科银耳属植物银耳的子实体。银耳多糖是银耳药材中的主要成分，近年来，对银耳多糖的化学结构及药理活性方面的研究很多，早在上个世纪70年代就发现银耳多糖具有提高机体免疫力、降血糖、降血脂、抗衰老、抗溃疡、增强肿瘤患者对放、化疗的耐受力及升高白细胞等作用。因此，银耳在我国具有悠久的药食兼用历史。　　中药中的化学成分十分复杂，很难根据测定其中一个或几个组分来确保药材或制剂的质量，而近年来，中药指纹图谱技术的发展与利用，可以较全面地反映中药所含化学成分的种类和数量，进而作为中药材和制剂的内控质量标准。　　本实验分别将十批不同来源的银耳子实体剪碎，加入20倍量的水，煎煮两次，每次6 h，合并两次滤液，浓缩至一定体积，加五倍量乙醇沉淀，离心，沉淀冷冻干燥即得银耳多糖。银耳多糖通过薄层色谱法（TLC）、气相色谱法（GC）和高效液相色谱法（HPLC）三种分析方法进行组成糖的分析，最终确定柱前衍生化高效液相色谱法是出峰最全、操作较简单、分离效果好、重现性好的方法，且其分析结果具有指纹性，因此确定用柱前衍生化高效液相色谱法为制作指纹图谱的最佳分析方法；实验中考察了不同衍生化温度、衍生化时间、HCl中和的用量，最终确定最佳衍生化条件为衍生化温度为70℃水浴，衍生化时间为加热30min，HCl的用量为与NaOH加入量的比值为1:1；同时在确定高效液相色谱法为最优分析方法后，对液相条件进行考察，如不同色谱柱、柱温、流动相、流速、检测波长、洗脱梯度和进样量等色谱条件，最终确定色谱条件为：色谱柱：Vertex AQ-C18分析柱；柱温：40℃；流动相：A：磷酸盐缓冲液（pH6.8）：乙腈（85：15，V/V）；B：磷酸盐缓冲液（pH6.8）：乙腈（60：40，V/V）；流速：0.9mL/min；检测波长：250 nm。梯度洗脱：时间梯度0 min→10 min→50 min，相应的浓度梯度为8％(B)→16%(B)→40%(B)；进样体积10μL。　　按照最佳条件对十批不同购买地的银耳药材中银耳多糖做指纹图谱的分析与方法学考察，应用FP-CASE相似度计算软件（由湖南中南大学梁逸曾教授领衔开发，为药典会认可试用的两个软件之一），供试品指纹图谱与随行对照物指纹图谱经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》计算，相似度均≥0.9。方法学考察结果显示十批银耳药材中的银耳多糖经衍生化后24 h内稳定良好，精密度和重现性均达到标准。　　通过对十批银耳药材中银耳多糖进行指纹图谱分析，为银耳药材质量鉴别提供一种科学的方法和依据，并可为其它中药材指纹图谱的建立提供借鉴。