【摘 要】
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本研究通过筛选获得一株发酵木糖产乙醇的菌株,并对该菌株进行了分子鉴定、系统发育树的建立、诱变育种以及培养条件的优化。1.以湖南农业大学周边农田土壤及农产品废弃物为
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本研究通过筛选获得一株发酵木糖产乙醇的菌株,并对该菌株进行了分子鉴定、系统发育树的建立、诱变育种以及培养条件的优化。1.以湖南农业大学周边农田土壤及农产品废弃物为筛选原料。分离得到一株降解纤维素并利用木糖的菌株。通过形态学、生理生化及ITS序列基因同源性分析,鉴定为脉孢菌(Neurospora)。2.对该菌株进行初步木糖发酵培养,脉孢菌在20g木糖,15g蛋白胨,10g酵母粉,1g(NH4)2SO4,1gKH2PO4,0.5gMgSO4-7H2O,1gCaCl2-2H2O,1000mL H2O的木糖基础培养基中,30℃,160r/min摇瓶培养三天后其乙醇的产率达到0.18g/g。3.通过紫外诱变、微波诱变、60Co辐照诱变和NTG诱变四种方法来诱变育种,筛选得到突变菌株UV2。UV2的乙醇产量达到4.14g/L,比原始菌株增加了27.8%。通过对突变菌株UV2进行RAPD分析,筛选出能扩增最多差异性条带的引物S22。4.针对培养温度、培养时间、木糖基础培养基底物浓度、接种量四个培养条件,进行4因素3水平的正交试验,探索脉胞菌发酵木糖产乙醇的最佳培养条件。获得最优发酵条件:在温度24℃、时间84h、木糖培养基底物浓度4%、最佳接种量1.5%条件下,其乙醇得率能达到0.44g/g。本研究为生物能源进一步研发提供了优良的菌种及合适发酵条件,充实了菌种资源库。
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