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核仁是真核细胞内rRNA转录和核糖体亚单位装配的场所,包括三种基本结构组分:纤维中心(FC)、致密纤维组分(DFC)和颗粒组分(GC)。rRNA前体的剪切加工是发生在核仁处的一项重要活动,fibrillarin和U3 snoRNA是参与rRNA前体剪切的两种重要因子,它们共同参与了pre-rRNA的5’ETS和18S rRNA的剪切过程。因此,研究fibrillarin和U3 snoRNA在核仁中的分布可以为rRNA前体的剪切加工位点和剪切产物转运的研究提供间接依据。本文以大蒜为材料,通过免疫标记和原位杂交的方法,在电子显微镜下观察细胞周期过程中fibrillarin和U3 snoRNA的分布变化,从而来进一步了解rRNA前体剪切加工的位点及变化。研究结论如下:
1、在核仁中,fibrillarin主要分布在靠近FC的DFC区域,GC区也有少量的分布,而在FC中无fibrillarin分布,且在细胞周期的G2期时,核仁中fibrillarin的密度达到最大。
2、在核仁中,U3 snoRNA也主要分布在靠近FC的DFC区域,GC区有少量U3的分布,而在FC中无U3 snoRNA分布,且在细胞周期过程中,S期和G2期的核仁中U3snoRNA的密度较大。
3、通过fibrillarin和U3 snoRNA在细胞中的分布情况可推测rRNA前体的早期剪切事件主要发生在靠近FC的DFC区域和GC区域,同时剪切活动在S期和G2期时较为活跃。