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奶牛乳腺炎作为制约奶牛业发展的关键因素,给奶牛养殖业农户带来了巨大的经济损失。目前,养殖户对病牛主要的治疗方式为使用大量抗生素类抑菌药物。由于抗生素的大量使用,已导致大量致病菌产生严重的耐药性,治疗效果逐渐减弱,治愈时间延长,并逐渐渐对某些抗生素产生抗药性。因此,寻找一种有效、安全的抗生素替代品是需要我们共同努力的目标。特异性卵黄抗体(Egg yolk immunoglobulin,IgY)可以预防和治疗由细菌引起的感染性疾病,具有安全、绿色环保、廉价且不会产生耐药性的特点,是一种很有应用前景和发展的抗生素替代品。已有文献报道将卵黄抗体应用到奶牛乳腺炎的治疗中,本文从新疆生产建设兵团患乳腺炎的病牛乳样中分离纯化病原菌,并将其用来制备卵黄抗体来治疗新疆兵团的临床型和隐性奶牛乳腺炎。研究内容和结果如下:首先,从60份临床型乳腺炎的奶样中共分离出14种细菌,其中两种主要病原菌:无乳链球菌9株,检出率20%,金黄色葡萄球菌7株,检出率15.56%。药敏实验结果显示无乳链球菌主要对万古霉素和青霉素耐药,金黄色葡萄球菌对青霉素、磷霉素、克林霉素、庆大霉素表现出耐药性。注射两株细菌的病鼠各组织器官出现广泛病变,脾脏肿大、坏死;肾脏肿大,色淡;肝脏颜色变深。其次,用灭活的金黄色葡萄球菌和无乳链球菌疫苗免疫蛋鸡,获得的特异性卵黄抗体的最高效价为1:32000和1:24000,并且高效价一直持续了10周(效价>10000);采用水稀释、二次盐析、超滤三种方法结合,获得高纯度的特异性IgY,纯度为82.5%。特异性卵黄抗体可以与两种细菌特异性结合,并且可以使细菌发生凝集作用,10 mg/mL的特异性IgY.较其他浓度更有效果。抗金黄色葡萄球菌和无乳链球菌的特异性IgY也能够与分离的其他四株金黄色葡萄球菌和四株无乳链球菌结合,免疫荧光电镜显示特异性IgY能够与两种细菌结合。最后,我们将患病奶牛治疗分为临床组和隐性组两组。临床型奶牛乳腺炎经特异性IgY治疗后,乳汁和絮凝情况得到明显改善,体细胞数由80万降低到40万,细菌数较治疗前明显降低,治愈率达到12.5%。隐性乳腺炎经特异性IgY治疗后,体细胞数从50万减低到30万,细菌数较治疗前明显降低,同时乳蛋白、乳糖和乳蛋白含量都有所提升,乳蛋白、乳糖含量明显升高,LDH和AKP均低于给药前,治愈率37.5%。综上所述,本研究利用分离纯化的奶牛乳腺炎的致病菌,成功制备了抗金黄色葡萄球菌和无乳链球菌两种特异性IgY,并研究了其体外活性并将其应用于实际乳腺炎的治疗中,为进一步将特异性IgY替代抗生素治疗奶牛乳腺炎提供依据。