NIBAN与肝纤维化关系的初步研究

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第一章NIBAN在DMN诱导的大鼠肝纤维化组织中的表达目的:建立二甲基亚硝胺(Dimethylnitrosamine,DMN)诱导的大鼠肝纤维化动物模型,观察大鼠肝纤维化组织中NIBAN蛋白的表达情况。方法:雄性Wistar大鼠18只,体重180g~220g,随机分为正常组和模型组两组,每组9只。适应性喂养1周后,参照Jezequel AM方法制作动物模型。模型组给予1%DMN腹腔注射,1ml/kg,每天一次,每周前三天连续给药,共28天;正常组每只大鼠给予lml/kg的生理盐水腹腔注射,每天一次,每周前三天连续给药,共28天,实验第28天称体重后处死所有大鼠。计算实验前后大鼠体重变化,计算肝指数、脾指数,留取血清测ALB、ALT、AST、TBIL,留取肝脏组织分别行:(1)肝组织病理检查(2)肝组织肝纤维化半定量评分(3)Western Blot检测NIBAN蛋白的表达水平。结果:①实验前后大鼠体重变化:正常组体重明显增加,模型组体重明显降低,两组具有统计学差异(p<0.05)。②肝指数、脾指数:与正常组相比,模型组肝指数明显降低(p<0.05);与正常组相比,模型组脾指数明显增加(p<0.05)。③肝功能:与正常组相比,模型组ALB水平明显降低(p<0.05), ALT、AST、TBIL水平均明显增高(p<0.05)。④肝脏纤维化半定量评分(SSS评分):与正常组相比,模型组肝脏纤维化半定量评分明显增高(p<0.05)。⑤肝脏组织中NIBAN表达水平:与正常组相比,模型组NIBAN表达水平明显降低(p<0.05)。结论:①成功建立了DMN诱导的大鼠肝纤维化动物模型②DMN诱导的大鼠肝纤维化动物模型的肝组织中NIBAN蛋白表达水平明显降低,NIBAN与肝纤维化的形成相关。第二章NIBAN在活化肝星状细胞中的表达目的:探讨NIBAN在肝纤维化中的作用,观察肝星状细胞活化后NIBAN蛋白的表达情况。方法:以肝星状细胞(LX-2)株为研究对象,分为对照组和模型组,模型组肝星状细胞予以TGF-β10ng/ml刺激48小时,运用Western Blot检测α-SMA、FN、NIBAN的表达水平。结果:与对照组相比,模型组α-SMA表达明显上升(p<0.05),FN表达明显上升(p<0.05),NIBAN表达明显降低(p<0.05)。结论:肝星状细胞活化后NIBAN蛋白的表达水平明显降低。
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