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随着近年来食品安全事件的发生,人们越来越多的关注食品安全问题。牛奶中抗生素及非法添加剂等的残留会对人体造成危害。然而在牛奶中残留物检测领域,现有方法存在诸多弊端,因此发展新的检测方法势在必行。本文采用基于表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,SPR)的生物传感器检测牛奶中抗生素和三聚氰胺的残留,由于SPR生物传感器在该领域的发展还不完善,现有检测技术单一,因此,本文主要研究和发展了新的检测方法,丰富了SPR生物传感器用于抗生素等小分子残留物的检测理论。
⑴研究了基于SPR生物传感器的信号放大策略。在溶液竞争法的检测基础上,引入二次抗体进行二次检测,对信号进行放大,用于提高传感器检测的灵敏度,降低检测限。并对三种残留物,即氨苄青霉素、卡那霉素、链霉素的水溶液进行实验研究。结果表明,利用竞争法检测,三种残留物的最低检测限(Limit Of Detection,LOD),分别为1.7ng/mL、25 ng/mL和34 ng/mL,而利用信号放大法检测,三种残留物的最低检测限LOD为0.346ng/mL、11.89ng/mL和24.29ng/mL。因此,经实验验证,信号放大检测法的最低检测限不仅低于欧盟对各自的最大残留检测限(Maximum Residue Limit,MRL),而且优于竞争检测法。
⑵提出了一种利用同一SPR生物传感器检测多种残留物的新方法。引入分子标记技术,采用二次竞争将对待测物的检测转化为对同一分子标记物的检测,从而实现一次固定配体对多种不同结构的残留物进行检测。采用牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA),分别对卡那霉素、三聚氰胺、氨苄青霉素和链霉素四种残留物进行分子标记,采用同一SPR传感器对其水溶液进行了检测,结果表明,四种残留物的检测限分别为14.3ng/mL、7.89 ng/mL、0.51 ng/mL和8.08 ng/mL,均低于各自的最大残留检测限。因此,该方法有效的解决了传感器的专一性问题。
⑶提出了基于SPR生物传感器检测牛奶中残留物的两种新技术,不仅采用实验验证了方法的可行性,并对待测样品的预处理、传感芯片表面的预处理以及溶液的检测等一系列实验步骤建立了标准实验流程。本文的研究成果还可以推广到其他食品药品残留的检测领域。