SPF鸡生产若干关键技术的研究

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针对国内外SPF(Specific Pathogen Free)鸡产业的发展趋势及存在的问题,本研究从以下方面对SPF鸡进行研究和分析,以促进我国SPF鸡产业相关科研和生产水平的提高。1.SPF鸡的营养需要及饲料生产技术的建立本部分进行了60Co辐照灭菌的最小有效剂量和高压蒸汽灭菌法最适灭菌条件的研究,分析比较了不同灭菌方式处理后SPF饲料的营养成分破坏程度及相应补偿办法和标准。在此基础上分别采用辐照灭菌饲料和高压蒸汽灭菌饲料饲喂SPF鸡,比较分析了不同处理灭菌饲料对SPF鸡生长和生产性能的影响。并根据SPF鸡特殊的生活环境条件及生物学特性,对SPF鸡的营养需要进行研究。结果表明:SPF鸡饲料采用10~15kGy的辐照剂量难以完全杀死全部细菌;而经20kGy以上的剂量辐照后,在30天之内未检到有细菌生长,可以认为20kGy的辐照剂量可以达到SPF鸡饲料灭菌的要求。采用高压蒸汽灭菌法时,灭菌物品的包装大小和形状对灭菌效果影响很大。饲料包装体积不宜过大,以扁平状为宜,厚度应小于15cm,饲料袋之间要有间隙,以加强蒸汽的通透性。在饲料包装符合要求的前提下,121℃下灭菌20min可以达到理想灭菌效果。采用辐照灭菌法处理SPF鸡饲料,除对维生素B1、B12、叶酸和生物素的破坏比较严重外,对其它营养成分的破坏比较轻;而采用高压蒸汽灭菌法时,饲料粗蛋白、大部分维生素成分及赖氨酸、精氨酸和胱氨酸的破坏都比较严重,特别是对赖氨酸及大部分维生素的破坏必须在生产实际中得到重视和补偿。采用两种灭菌方式处理过的饲料,通过进行相应的营养成分补充后,未见对SPF鸡生长性能产生显著的不同影响。而且辐照后饲料明显有异臭味,变得特别细碎,粉尘增多,适口性变差。相对而言,鸡反而喜欢采食高压蒸汽灭菌饲料。SPF鸡长期采食高压蒸汽灭菌饲料,在产蛋率以及种蛋合格率方面没有发现不良影响。2.SPF鸡群的遗传控制和生长及生产性能研究本部分采用RAPD方法进行了不同品系SPF鸡群的遗传结构分析,对不同品系SPF鸡的生长及生产性能进行测定分析并对同品系不同世代的SPF鸡生长性能进行比较,在此基础了对我国SPF鸡的育种方案进行探讨。不同品系SPF鸡群RAPD分析结果表明,RAPD随机引物较多,但具有多态性且重复性好的引物较少,本实验采用了60个随机引物进行筛选,结果12个引物没有产生条带或条带不清晰而无法判断,其它48种引物均获得清晰条带,其中13个引物产生了稳定、清晰、重复性好的RAPD标记,其余引物均表现单态。13种引物共产生条带91个,其中多态性片段数64条,占总片段数的70%,这说明RAPD多态性丰富,能迅速提供大量DNA标记。对照系的品系内平均相似系数为0.968,而三个SPF鸡品系的品系内平均相似系数在0.673~0.903之间,其中B系为0.903,面F系和M系分别为0.673和0.755,说明F系和M系的纯合程度均较低,而B系较高;聚类分析结果发现F系与M系、B系与对照H系分别聚为一类,说明F系与M系的遗传距离较近,而与B系之间距离较远。三者亲缘关系以F系与M系较近。这真实地反映了国内引进SPF鸡种源不一、纯度不同、遗传结构较为丰富的情况。SPF鸡的育种可以以现有SPF鸡群组成基础群,育种目标以生产性能和病原敏感性指标为主,育种方法应采用组选择法结合分子标记辅助选择法,近交程度不必要很高。性能测定结果表明,三个品系SPF鸡的前期生长性能基本一致,但育成后期体重有一定的差异性,在相同的饲养条件下,B系后期体重增加较快,而F系与M系基本相同,但开产前体重三个品系趋于一致。不同品系SPF鸡的产蛋性能有明显的差异,以M系产蛋性能最好,F系与B系差别不大;不同品系SPF鸡群的生长性能在各世代基本稳定,没有出现明显的近交衰退现象。3.SPF鸡胚的应用效果研究本研究采用SPF鸡胚和普通鸡胚分别接种新城疫、传染性支气管炎、禽脑脊髓炎和传染性法氏囊病毒,对病毒在不同鸡胚上的增殖规律进行了研究。结果表明,普通种蛋卵黄中ND抗体水平普遍较高(≥26.9),且不均匀,IBD抗体阳性率为87.5%~100%。LaSota病毒在SPF鸡胚上的繁殖速度比普通鸡胚快,病毒含量高5~20倍。接种LaSota病毒后96h,SPF鸡胚的死亡率高于65%,而普通鸡胚死亡率一般低于5%;SPF鸡胚尿囊液中病毒HA效价较普通鸡胚尿囊液病毒效价平均高2~2.5个滴度。MA5毒株接种普通鸡胚后死亡率较低,病毒液的EID50相差较大;而SPF胚的鸡胚死亡率较高,病毒液EID50为普通鸡胚的10倍以上,且稳定性好。接种AEV后,普通鸡胚的病变率分别为4.5%和5%,而SPF鸡胚病变率为85%以上,病毒滴度大于106EID50/ml。传染性法氏囊病毒在普通胚上繁殖困难,鸡胚死亡率非常低,不能用于疫苗生产;SPF鸡胚的病变率高(86.7%~97%),可利用率很高。总之,不同病毒在SPF鸡胚上的增殖都远远好于普通鸡胚,SPF鸡胚是生产禽用疫苗的优质原材料。
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