为了进一步的探索体细胞保存在物种遗传资源保存中的应用，本试验以我国地方品种多浪羊为研究对象，采用组织块贴壁培养方法建立了多浪羊成纤维细胞系，并根据美国ATCC的建系标准对所建的细胞系进行了生物学检测，并继续研究了川陈皮素对其多浪羊成纤维细胞凋亡的影响。研究结果如下： 1.多浪羊的样本含量为40，细胞传代次数为3代，冻存管数为103支，每支冻存管中的细胞数量为3.88×106个细胞/ml。 2.所培养的多浪羊细胞具有典型的成纤维形态，绝大部分呈梭形或者不规则三角形。细胞生长时呈火焰状、旋涡状或者放射状走势，在镜想下观察，细胞生长健康且形态良好。 3.多浪羊成纤维细胞复苏后，其生长曲线均呈“S”型，细胞经历了潜伏期、对数生长期及停滞期，符合细胞在体外生长繁殖的一般规律。冻存前存活率为96.8％；复苏后存活率为94.4％。 4.对所建多浪羊细胞系进行细菌、真菌及支原体等微生物检测，结果均呈为阴性。 5.核型分析表明，多浪羊的二倍体染色体数目2n=54，未见异常，染色体畸变率均低于3％，染色体结构未有变异，表明所建多浪羊细胞系的细胞均为稳定的二倍体细胞，在体外遗传性能稳定。 6.多浪羊细胞的LDH和MDH同工酶酶谱分析表明，呈现其独特的条带，LDH同工酶为5条：MDH同工酶为2条，具有着种属特异性，可作为品种和物种分类的主要依据之一。细胞遗传性能稳定，表明未发生恶性转化及与其它物种细胞的交叉污染。 7.通过凋亡细胞形态观察，细胞周期、细胞膜电位、细胞凋亡率的检测，结果表明：50mg/L、60 mg/L、70 mg/L、80 mg/L、90 mg/L的川陈皮素作用48h后，AO/EB染色并在光镜下观察，50mg/L、60 mg/L组细胞形态无明显改变，70 mg/L、80 mg/L、90 mg/L组细胞出现明显形态的改变、胞体变小、撕裂、皱缩等。大部分细胞很快的崩解、坏死，出现典型的凋亡特征。Annexin V/PI双染法检测到随着川陈皮素浓度的增大而凋亡率明显增高。罗丹明123结合流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位，发现与对照组相比，川陈皮素处理组细胞的线粒体膜电位明显降低。以上凋亡效应均里浓度依赖性增强。