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背景:外泌体是一种由细胞产生的,直径30~150 nm的细胞外囊泡,可包裹、富集来源细胞的miRNA,是一种优良的天然核酸药物载体。而使用来源于过表达miR-140-5p的滑膜间充质干细胞(SMSC)的外泌体(SMSC-140-Exos)和过表达miR-126-3p的SMSC的外泌体(SMSC-126-Exos)用于组织修复,以及使用低温聚合的壳聚糖水凝胶(CS)作为外泌体的缓释载体,目前尚未见报道。目的:探讨SMSC-140-Exos能否用于骨关节炎预防,SMSC-126-Exos能否用于促进慢性创面修复,深入探讨其中的分子机制,以及评价CS能否用于外泌体缓释。方法:在SMSC中分别过表达miR-140-5p和miR-126-3p,提取SMSC-140-Exos和SMSC-126-Exos,并进行外泌体鉴定。体外缓释实验观察CS缓释外泌体的功能;体外细胞实验观察外泌体对软骨细胞和内皮细胞增殖、迁移以及功能的影响,以及对于重要信号通路的影响;体内实验观察外泌体对骨关节炎的预防作用和对慢性创面的促修复作用。结果:(1)成功分离提取SMSC-140-Exos和SMSC-126-Exos,并建立相应的动物模型;(2)通过透射电镜、动态光散射以及表面标志物检测,证明外泌体的分离提取成功;(3)通过定量PCR(qPCR)证明过表达miR-140-5p和miR-126-3p成功,并于对应的外泌体中高表达;(4)对外泌体进行荧光标记,观察到外泌体可以被细胞摄取;通过ExoELISA检测证明CS可以用于外泌体缓释;细胞实验观察到SMSC-140-Exos可以促进软骨细胞的增殖和迁移,并且维持软骨细胞的功能,SMSC-126-Exos可以促进血管内皮细胞的增殖、迁移和成管;体内,SMSC-140-Exos可以预防骨关节炎,SMSC-126-Exos可以促进慢性创面的修复;(5)SMSC-140-Exos预防骨关节炎的机制:其组分Wnt5a/b可以通过非经典Wnt通路激活YAP,促进软骨细胞的增殖和迁移,而另一组分miR-140-5p可以通过靶向RalA稳定细胞外基质的表达;(6)SMSC-126-Exos促进慢性创面修复的机制:miR-126-3p通过激活PI3K/Akt和MAPK/ERK促进血管新生。结论:(1)SMSC-140-Exos可用于骨关节炎预防,SMSC-126-Exos可用于促进慢性创面修复;(2)CS可用于外泌体缓释;(3)SMSC-140-Exos通过非经典Wnt通路激活YAP,促进软骨细胞的增殖和迁移,同时通过miR-140-5p靶向于RalA稳定细胞外基质的表达;(4)SMSC-126-Exos通过激活PI3K/Akt和MAPK/ERK促进血管新生。