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目的: 通过研究镉暴露对未成年雌性大鼠卵巢生长发育及FSHR表达的影响,为镉生殖毒性及其机制的进一步研究提供科学依据。 方法: 未成年雌性Wistar大鼠(21日龄)48只按体重随机分为4组,每组12只,染毒剂量(以CdCl2计)分别为0.5、2.0、8.0(㎎/㎏)和对照组(仅给予蒸馏水),每日灌胃染毒一次(按10ml/kg等容量给药),每周6天,持续5周。染毒第5周开始每天2次用阴道脱落细胞涂片法连续观察并记录动情周期。于动情前期处死大鼠,观察指标包括:动情周期、体重、卵巢脏器系数、血清雌、孕激素,卵巢各级卵泡数、卵巢颗粒细胞体外培养液中雌激素(Estradiol,E2)和孕激素(Progesterone,P)水平。进一步应用免疫组织化学法测定卵巢卵泡刺激素受体(FollicleStimulatinghormonereceptor,FSHR)表达,并采用Western-blot和荧光定量PCR法分别测定卵巢颗粒细胞的FSHR蛋白和mRNA的表达。 结果: 1、与对照组相比,8mg/kg组动情间期明显延长而动情期明显缩短(P<0.05)。 2、各染毒剂量组的卵巢重量和脏器系数与对照组相比,未出现明显差异(P>0.05)。 3、与对照组相比,8mg/kg组闭锁卵泡的构成比显著升高而生长卵泡显著下降(P<0.05)。 4、与对照组比较,各染毒组血清中E2、P未出现明显变化(P>0.05)。 5、各染毒组颗粒细胞培养液中E2、P水平均明显降低,与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。 6、应用免疫组织化学技术观察卵巢FSHR表达,与对照组相比,各染毒组卵巢FSHR表达均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。 7、应用蛋白质印迹法观察FSHR蛋白的相对表达量,2mg/kg、8mg/kg组FSHR蛋白表达均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。 8、应用荧光定量PCR法观察FshrmRNA的相对表达量,各染毒剂量组FSHRmRNA表达均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论: 根据以上结果,可得出如下结论: 1.未成年雌性大鼠亚慢性镉暴露后卵巢生长发育受到明显损害,可以表现为动情前期明显缩短、动情间期延长及动情周期异常发生率明显上升、卵泡发育障碍、卵巢颗粒细胞类固醇激素分泌功能异常等。 2.镉对卵巢颗粒细胞FSHR的基因和蛋白表达具有明显的抑制作用,从而可能影响下丘脑—垂体—卵巢性腺轴对卵巢的调控作用,干扰卵巢的正常生长发育。