大黄素对异丙肾上腺素诱发大鼠心肌纤维化的影响

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目的:心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)是指在各种致病因素(炎症、缺血、缺氧等)作用下,心肌的正常组织结构中胶原纤维过量积聚,心肌组织中胶原浓度显著升高或胶原成份发生改变。这种病理变化存在于多种心血管疾病中,是心脏功能由代偿期向失代偿期转变的关键。心肌纤维化的改善可减轻心肌组织和间质之间失平衡,改善心肌的僵硬度,有利于心功能的恢复。大黄素(Emodin)化学名为1.3.8-三羟基-6甲基蒽醌(1.3.8—trihydroxy—6methy lanthraquinone),分子式为C15H10O5,分子量为270.23,其化学结构属于羟基蒽醌类。大黄素是中药大黄的主要有效成分,具有广泛的药理学作用:抗炎、抑菌、免疫调节,保护肝肾、抗肿瘤等。近年来研究表明大黄素还具有抗器官纤维化的作用,多集中在肝、肾、胰腺方面,对心肌纤维化的影响尚未见报道。本实验通过研究大黄素对异丙肾上腺素诱(Isoproterenol, ISO)发大鼠心肌纤维化的影响,探讨作用的可能机制,为中西医结合防治心肌纤维化提供理论依据。方法:将63雄性SD大鼠随机分成3组,每组21只。A:异丙肾上腺素组背部皮下注射ISO5mg·kg-1·d-1,连续7天;B:大黄素治疗组背部皮下注射ISO5mg·kg-1·d-1,连续7天;C:正常对照组皮下注射生理盐水1ml·d-1,连续7天。7天后A、B、C组各随机处死大鼠一只取心肌标本,心肌标本经HE染色后,在光镜下观察心肌组织病理变化,A、B组出现明显的心肌纤维化,确定造模成功。分别给予:A组:灌服5ml生理盐水8周;B组:大黄素40 mg·kg-1·d-1与0.5%的羧甲基纤维素钠5ml混合形成悬浊液灌胃,连续8周;C组:灌服等体积的生理盐水8周。各组分别于实验第4周及第8周随机选取一半大鼠称取体重(body weight, BW),并将大鼠处死后立即取血和心肌标本,观察各组大鼠左心室重量(Left ventricular weight, LVW)及左室重量指数(Left ventricular weight index, LVI=LVW/BW),检测各组大鼠血清一氧化氮(Nitrogen monoxidum, NO)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA) ,血栓素A2(Thromboxan, TXA2)、前列环素(Prostacyclin, PGI2)。HE染色后,在光镜下观察心肌组织病理变化,MASSON胶原纤维特异染色后观察心肌胶原纤维增生情况。结果:1.LVI的统计结果实验第4周时大鼠心脏重量指数正常组与模型对照组相比差异具有显著性(P<0.01);实验第4周大黄素组与模型组大鼠心脏重量指数相比差异具有显著性(P<0.01)。实验第8周大鼠心脏重量指数正常组与模型对照组相比差异具有显著性(P<0.01);实验第8周大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);实验第8周大黄素组与实验第4周大黄素组心脏指数相对比,差异具有显著性(P<0.01)。结果显示大黄素能减轻异丙肾上腺素造成的大鼠心脏指数,改善心肌纤维化。2.实验各组血清NO变化第4周时,正常组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);第8周第二次取血,正常组与模型对照组相比,差异具有显著性( P<0.05);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);实验8周大黄素组与实验4周大黄素组相比无明显差异(P>0.05);结果显示大黄素组能提高异丙肾上腺素损伤大鼠血清中的NO含量。但第8周与第4周比较差异无显著性。3.实验各组血清SOD的变化第4周时,正常对照组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);第8周第二次取血,正常组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);实验8周大黄素组与实验4周大黄素组相比差异具有显著性(P<0.05);结果显示大黄素组能提高异丙肾上腺素损伤大鼠血清中的SOD含量,且随时间延长血清中SOD的含量也相应增加。4.实验各组血清MDA的变化第4周时,正常组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性,(P<0.05);第8周第二次取血,正常对照组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);实验8周大黄素组与实验4周大黄素组相比差异具有显著性(P<0.05);结果显示大黄素组能降低异丙肾上腺素损伤大鼠血清中的含量,且随时间延长血清中MDA的含量也相应降低。5.实验各组血浆PGI2的变化第4周时,正常组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性,(P<0.01);第8周第二次取血,正常对照组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);实验8周大黄素组与实验4周大黄素组相比差异不具有显著性(P>0.05);结果显示:大黄素组能升高异丙肾上腺素损伤大鼠血浆中PGI2的含量。但第8周与第4周比较差异无显著性。6.实验各组血浆TXA2的变化第4周时,正常组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);第8周第二次取血,正常对照组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);大黄素组与模型对照组相比,差异具有显著性(P<0.01);实验8周大黄素组与实验4周大黄素组相比差异不具有显著性(P>0.05);结果显示大黄素组能提高异丙肾上腺素损伤大鼠血浆TXA2的含量。但第8周与第4周相比较差异无显著性。结论:1.大剂量异丙肾上腺素能够引起大鼠心肌纤维化,病灶主要位于心内膜下。2.大黄素可以通过升高血清中NO的含量,抑制异丙肾上腺素引起的心肌纤维化。3.大黄素可以通过升高血清中SOD的含量,降低MDA的含量,抑制异丙肾上腺素引起的心肌纤维化。4.大黄素可以通过升高血浆中PGI2含量,减少TXA2含量来抑制异丙肾上腺素引起的心肌纤维化。
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