【摘 要】
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目的研究大鼠脊髓内过表达p27kip1对于细胞周期及脊髓损伤的影响。为细胞周期抑制剂治疗脊髓损伤提供进一步的依据。方法选取雄性SD大鼠,注入携带p27kip1基因的慢病毒(LV-p27
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目的研究大鼠脊髓内过表达p27kip1对于细胞周期及脊髓损伤的影响。为细胞周期抑制剂治疗脊髓损伤提供进一步的依据。方法选取雄性SD大鼠,注入携带p27kip1基因的慢病毒(LV-p27kip1)在脊髓中过表达p27kip1后进行脊髓损伤,后在不同的时间点进行BBB和CBS功能学评分及取出大鼠脊髓,通过免疫印迹、免疫荧光、免疫组化及体外细胞培养等研究过表达p27kip1在脊髓损伤中的作用。结果Western-blot显示慢病毒介导的p27kip1可稳定的在脊髓中过表达,可以明显抑制细胞周期相关蛋白的表达;BBB、CBS功能评分显示LV-p27kip1组评分明显高于对照组;免疫荧光显示LV-p27kip1可减少脊髓损伤后的组织缺损;同时,Western-blot及免疫荧光显示LV-p27kip1抑制星形胶质细胞及小胶质细胞的活化,抑制炎症因子的释放,减少神经元凋亡及增强髓磷脂碱性蛋白(MBP)的表达。在体外,划痕实验显示过表达p27kip1可抑制原代星形胶质细胞的迁移。结论慢病毒可作为一个满意的载体以在脊髓中过表达p27kip1。通过在脊髓中过表达p27kip1,可改善损伤后的功能恢复,减弱星形胶质细胞和小胶质细胞的活化程度,减少细胞凋亡并改善局部微环境。
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