诺卡氏菌环氧琥珀酸水解酶活性影响因素的研究

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该研究的主要内容是采用改进工艺对诺卡氏菌进行发酵,得环氧琥珀酸水解酶活性高的菌体;研究影响酶活性的因素,在反应温度下酶的稳定性,以及酶在转化反应中的特性;并对细胞的固定化进行初步研究.环氧琥珀酸水解酶是一种胞内酶,细胞的通透性对完整细胞的表观比酶活影响很大.用环氧琥珀酸对细胞进行预处理,可增强细胞的透性,其表观比酶活可提高两倍多;同时在进行转化反应中,可大大缩短转化时间.细胞破碎后,酶活可为完整细胞的45倍以上.在反应温度下,破碎细胞酶不稳定,半衰期仅为10.4min;完整细胞显示的半衰期为19.0min,而其胞内实际酶活为144min.在有底物存在时,酶的活性则基本不变.在进行环氧琥珀酸的水解反应时,完整细胞和破碎细胞均显示底物抑制作用.
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