目的:鉴定乳腺癌细胞中EZH2与Mnc2蛋白质相互作用,探讨EZH2及Mnc2基因在乳腺癌细胞中的功能和机制。方法:1.通过免疫共沉淀的实验方法以及Western Blot实验方法验证了EZH2与Mnc2的相互作用。2.分别利用脂质体转染及病毒感染的方法构建了过表达及沉默Mnc2细胞系。3.在诱导型沉默细胞模型中,利用Western Blot检测了Mnc2对组蛋白H3第二十七位赖氨酸三甲基化(H3K27me3)的调控作用。4.在过表达及沉默Mnc2细胞模型中,通过细胞计数法研究Mnc2对乳腺癌细胞的增殖的影响。结果:免疫共沉淀实验表明Mnc2与EZH2存在相互作用。成功构建了过表达Mnc2细胞系MDA-MB231-Tenton-HAMnc2,利用抗HA抗体检测到HAMnc2高效表达,在过表达Mnc2细胞系中证明了Mnc2具有促进乳腺癌细胞增殖功能。构建了沉默Mnc2的细胞系T47D-shMnc2,在此细胞系中进一步验证了Mnc2促进细胞增殖功能。构建了强力霉素诱导型沉默Mnc2细胞系T47D-Tenton-shMnc2,在此细胞模型中检测到沉默Mnc2表达后可以升高细胞内组蛋白H3K27me3水平。结论:1.本研究验证确定了Mnc2蛋白为EZH2的相互作用蛋白。2.过表达Mnc2基因可以促进乳腺癌细胞增殖,并且沉默Mnc2基因可以抑制乳腺癌细胞增殖,证明Mnc2有调控乳腺癌细胞增殖的功能。3.Mnc2具有调控EZH2对H3K27三甲基化修饰的功能。