研究目的:脑出血后血红蛋白降解释放的铁离子在急性期过后仍长期滞留于脑内。本研究拟观察脑出血后潴留于脑内的铁离子是否对脑组织产生迟发性损伤,并对其机制进行探索。研究方法:本研究分两部分。第一部分:通过大鼠自体血基底节模型和大鼠海马氯化亚铁注射模型,观察是否存在迟发性脑萎缩并进行FJC染色检测建模后2周时是否仍存在神经元变性。同时,在不同时间点应用Perl’s染色观察铁离子脑内潴留情况,应用OX-6染色观察小胶质细胞激活情况,运用磷酸化P65染色观察NF-κB活化情况,运用铁蛋白/OX-42复染观察脑出血后铁蛋白在小胶质细胞中的表达情况。并观察铁离子螯合和米诺环素治疗对迟发性脑萎缩和神经功能的影响。第二部分:进行小胶质细胞和神经元培养。通过OX-6染色和磷酸化P65染色分别观察Fe²⁺对小胶质细胞的激活作用和对小胶质细胞NF-κB活化的影响。通过Fe²⁺直接处理神经元和Fe²⁺处理小胶质细胞后所得上清再处理神经元观察Fe²⁺对神经元的作用途径,明确小胶质细胞在其中的作用,并给予米诺环素进行干预治疗。结果:大鼠脑出血模型中12周仍存在铁离子潴留和出血侧铁蛋白染色增强,复染提示脑出血后4周后铁蛋白轻/重链主要表达于小胶质细胞。脑出血后2周时,出血侧基底节未见明显萎缩,在4周时萎缩出现,到8周时则更显著。FJC染色提示2周时,血肿侧仍有变性神经元存在。在海马FeCl₂注射模型中也能在2周时检测到变性神经元。铁离子螯合治疗可以有效减轻脑出血后的迟发性脑萎缩。小胶质细胞激活和NF-κB的活化现象在脑出血模型和海马FeCl₂模型中都存在并至少持续至建模后2周。米诺环素可以减轻脑出血后的迟发性脑萎缩。Fe²⁺能直接激活培养小胶质细胞。Fe²⁺直接作用于培养神经元,不能引起其LDH水平的增高,而Fe²⁺处理后的小胶质细胞进一步孵育产生的上清对神经元具有损伤作用,应用米诺环素则能有效逆转这种损伤,米诺环素还能抑制小胶质细胞激活和NF-κB的活化。结论:1)大鼠脑出血模型中存在迟发性脑损伤。2)Fe²⁺可以通过激活小胶质细胞进而引起神经细胞的死亡。3)脑出血后迟发性脑损伤与铁离子长期潴留于脑内有关。长期潴留于脑内的铁离子可能通过小胶质细胞激活引起神经元的迟发性变性死亡。NF-κB活化可能参与了这一过程。研究不仅揭示脑出血后存在的迟发性损伤这一病理现象并对其机制进行了探讨,同时也为今后临床治疗提供了新的思路。