绿盲蝽触角均一化全长cDNA文库构建与化学感受蛋白基因发掘研究

来源 :山东农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lclanki
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
化学通讯对于没法借助语言和文字交流的昆虫来说是昆虫个体之间,以及与周遭环境传递和接受信息的至关重要的方式。嗅觉系统,是感受化学通讯的最主要的生理系统。昆虫嗅觉识别机制的阐明,有助于人们开发更加有效,更加绿色的防治手段来控制害虫。绿盲蝽Apolygus lucorum在我国大范围商业化种植BT棉后,在棉田生态系统中替代棉铃虫成为主要害虫。与嗅觉相关的蛋白质是行使这个识别机制功能过程中不可缺少的物质基础,这些蛋白包括化学感受蛋白(chemosensory proteins;CSPs)、气味结合蛋白(odorant binding proteins;OBPs)、嗅觉受体(olfactory receptors; ORs)、神经元膜蛋白(sensory neuron membrane proteins; SNMPs)和气味降解酶(odorant degrading enzymes;ODEs),在防治绿盲蝽的手段中可以作为新的潜在靶标基因加以利用。其中,化学感受蛋白在嗅觉识别中行使结合气味物质的功能,同时在其他生理方面也有多种不同功能。所以,在本文中,构建的绿盲蝽触角均一化cDNA文库里,有针对性的鉴别得到8个绿盲蝽化学感受蛋白基因,并命名为AlucCSP1-8。之后对这8个基因进行了生物信息学分析和组织表达谱的分析。   1.借助SMART技术成功的构建了绿盲蝽触角均一化cDNA文库,利用生物信息学方法对文库进行了聚类分析,一共获得unigenes3881条,unigenes平均长度1143.87 bp,碱基长度大于等于400bp的unigenes共3753条,占总unigenes的96.7%。之后对全部unigenes进行功能注释,结果显示更具其功能不同共分成了3个大类分别是细胞组分cellular components共396条,分子功能molecularfunctions共934条和生物过程biological processes共745条。KEGG分析结果显示,共定位1590个pathway,涉及到5个大类分别是新陈代谢Metabolism,遗传信息处理Genetic Information Processing,环境信息处理EnvironmentalInformation Processing,细胞过程Cellular Processes,人类疾病HumanDiseases。以上结果反应出文库涉及基因全面,质量较高。   2.从文库中已获得的ESTs序列中筛选出了8个绿盲蝽化学感受蛋白基因AlucCSP1-8,并根据其编码的氨基酸序列构建了Neighbor-joining tree,并比对了同源性,在结果中可以看出AlucCSP3的相似性和遗传距离与其他基因最远。根据其基因序列预测了其编码的氨基酸序列,然后分析了CSPs在绿盲蝽中的氨基酸结构通式。   3.借助Real-time PCR方法检测了8个CSPs在成虫不同组织部位间的表达差异。结果显示,在绿盲蝽中CSPs在胸腹表达量基本都较低,而在触角,足部表达最高,其次在翅膀表达量也较高,而在头部略有表达。比较特殊的AlucCSP3特异性的在触角高表达,AlucCSP1,8在足中表达量最高,AlucCSP2,4,5,6,7在雌触角和足中表达量都很高。通过这一结果和氨基酸结构可以推测,AlucCSP1,8为一类,AlucCSP3单独为一类,而AlucCSP2,4,5,6,7,可能是另一类,他们在绿盲蝽体能各自行使着不同的功能。
其他文献
茶园深耕时期有七金八银的农谚,但是缺乏理论依据,因此,本试验旨在通过茶园不同深耕时期的研究,探明其对茶树的生长,茶叶产量,茶园土壤理化性质的影响,为确定本场今后茶园深
以往的工程勘察报告由于缺少结合基础设计和施工需要评价地下水对岩土工程的作用和危害,按设计报告施工后在一些地区已发生多起因地下水造成基础下沉和建筑物开裂的质量事故.
为寻找环境友好杀线虫剂,本文通过对苦豆子醇水提取物与甲维盐以3∶1的质量比进行混配,筛选出了2%苦豆子总碱·甲维盐微乳剂的最佳配方,同时通过温室盆栽试验、大田试验对该混剂
哈茨木霉是食用菌栽培过程中一种主要的病害为害,能使食用菌大幅减产并使其品质降低。以食品工业上所用杀菌剂纳他霉素与6种常见农用杀菌剂为供试药剂通过平板生长抑制法以及平菇栽培试验评估纳他霉素对哈茨木霉的防效以及平菇栽培的安全性,并通过混配试验筛选出纳他霉素与不同杀菌剂混配对哈茨木霉防治的最佳的比例。此外,还测试了平菇、木耳、灵芝、草菇、香菇58个菌株对哈茨木霉拮抗能力,以期为哈茨木霉的防治提供参考依据
玉米品种鲁玉14鲁玉14是山东农业大学玉米遗传育种研究室利用国内外优秀种质资源和先进的抗旱育种技术设备培育的单交种。母本D5,父本A12,均由山东农业大学自育而成。1995年经山东省农作物品
贮藏马铃薯种薯应采取以下措施:一、贮藏前的处理 1.马铃薯贮前应进行干燥处理。干燥时应阴干,不能见直射光,以防块茎变绿。2.伤皮的马铃薯应促其木栓化。具体方法是:将种薯
本研究通过野外行为学实验证实了该推测,并研究了胸窗萤雌萤在求偶中这两种信号的作用;通过GC-EAD和GC-MS实验对胸窗萤性信息素的组份进行了初步的研究。通过野外实验发现,胸窗
在建植8年经更新改良的人工草地上进行放牧强度、分区轮牧和连续放牧的比较试验表明,人工草地适宜的放牧强度为40%的利用率,过度放牧会造成草地牧草产量下降,杂草增加四川麻羊
为了选育高产、抗病、优质的食用品种,于1980年用 CIP 378177为母本、波友1号为父本进行有性杂交,至1989年育成了符合育种目标的晚熟食用新品种克新10号。克新10号的亲本 CI
电网智能化是世界电力发展的趋势,发展智能电网已在世界范围内形成共识,智能变电站作为智能电网运行数据的采集源头和命令执行单元,是建设坚强智能电网的重要组成部分.随着智