喹赛多作为喹嗯啉类新药,对畜禽及水产品中常见病原菌有良好的抑菌作用,并且能够提高饲料转化率,促进机体生长。与同类药物相比,喹赛多具有安全性更高、毒副作用更低的特点。而作为食品动物用药,对其安全性评价是新药开发的重要内容。兽药残留是影响食品安全的主要因素,但是关于喹赛多在畜禽及水产品中的残留消除研究并没有完全清楚。目前国际上公认的可食性组织包括肝、肾、肌肉、脂肪,而在我国,除了肝、肾、肌肉和脂肪外,主要的可食性组织还有心、肺、胃、大肠和小肠。目前关于喹赛多的残留消除研究已在畜禽的肝、肾、肌肉、脂肪中开展,但是喹赛多在心、肺、胃、大肠和小肠中的残留消除研究仍未见报道。本课题以猪、鸡和鲤鱼为研究对象,建立了喹赛多及其5种主要代谢产物在各可食性组织中残留检测的高效液相色谱方法,并对这些化合物的残留消除规律进行研究。本研究表明,喹赛多用于猪、鸡和鲤之后,吸收和消除迅速。通过本研究进一步确定了喹赛多在猪和鸡体内的残留靶组织是肾脏,残留标示物是Cyl；在鲤体内的残留靶组织是胃肠,残留标示物是Cy1。阐明了喹赛多在动物体内的安全性,为食品安全评价提供理论依据和技术支持。1残留检测方法的建立本实验建立了喹赛多(Cy0)、脱二氧喹赛多(Cyl)、N4-脱一氧喹赛多(Cy2)、N-(喹噁啉-2-甲基)-氰乙酰肼(Cy4)、喹嗯啉-2-羧酸(Cy6)和2-氰基-N’-(N1-氧喹噁啉-2-亚甲基)乙酰肼(Cy9)六种化合物在猪和鸡的肝脏、肾脏、肌肉、脂肪、心、肺、胃、大肠和小肠9种可食性组织：鲤鱼的肝脏、肾脏、肌肉、脂肪、皮肤和胃肠道6种可食性组织中的残留检测方法。各组织依次通过乙酸乙酯提取、体积比为1：50：10：39的甲酸：甲醇：乙腈：水复合试剂提取、正己烷去脂和亲水亲脂平衡型共聚物(HLB)小柱净化,最后经体积比为15：85的乙腈：水混合试剂复溶,320 nm紫外波长下通过高效液相色谱进行检测。该方法下Cy0、Cy1和Cy6在猪和鸡的肌肉、心脏、肺脏及鱼的肌肉、皮肤和胃肠的定量限为15μg/kg,在猪和鸡的肝、肾、脂肪、胃、大肠和小肠及鱼肝、肾和脂肪中的定量限为20μg/kg;Cy2、Cy4和Cy9在猪和鸡的肌肉、心脏、肺脏及鱼的肌肉、皮肤和胃肠的定量限为20μg/kg,在猪和鸡的肝、肾、脂肪、胃、大肠和小肠及鱼肝、肾和脂肪中的定量限为40μg/kg。添加不同定量限水平上浓度的药物,回收率在均在60%以上,且日间变异系数在12%以下。农业部规定残留检测方法日间相对标准偏差17%-21%,本实验建立的方法满足该要求,能用于喹赛多及其代谢产物的定量分析。2喹赛多在猪、鸡和鲤体内的残留消除研究健康三元杂交猪25头、20日龄科宝肉鸡30羽和健康鲤鱼30尾,各分成5组。连续饲喂添加200 mg/kg喹赛多的饲料2周,停药后于不同时间点宰杀一组,收肝脏、肾脏、肌肉、脂肪、心、肺、胃、大肠和小肠。按上述方法对组织中药物的含量进行测定,结果如下：猪：停药6 h,除脂肪外各组织均检测到原形和QCA,药物浓度范围分别为21.8-66.3μg/kg和22.4-56.9μg/kg;各组织中均检测出Cyl,浓度范围是20.4-66.0μg/kg,原形和QCA在猪体内消除迅速。停药1 d,各组织中原形均消除至定量限以下,肾脏和肺脏中检测出QCA,浓度分别为22.3 μg/kg和25.1 μg/kg;肝、肾、肺和小肠中检测到Cyl,浓度范围是20.8-44.2μg/kg,肾脏最高。停药3 d,各组织中QCA均消除至定量限以下,只有肾脏中能检测到少量的Cyl。停药7d各组织中Cyl均低于定量限。鸡：肌肉和脂肪没有检测到任何代谢产物。停药6 h,原形药物只在肝脏、肾脏、小肠、心、肺和胃中检测出,浓度范围是21.4-67.2μg/kg,肾脏最高；肝脏、肾脏、心脏、肺脏和小肠中均检测到QCA,浓度范围为24.7-66.8μg/kg,肾脏中最高；肝脏、肾脏、心、肺、大肠和小肠检测出Cyl,浓度范围是32.8-65.6μg/kg。停药1 d,原形和QCA仅在肾脏中检测出,浓度分别为34.1和32.5μg/kg;在肝、肾和肺中检测出Cyl,浓度分别为32.0、47.4和23.0μg/kg。停药3 d,仅在肾中检测出少量的Cy1。停药5 d,各组织中检测不到任何代谢产物。鲤：停药6 h,各组织中除原形、脱二氧喹赛多和QCA外,还在皮肤和胃肠中检测出Cy4,在肾脏、肌肉、脂肪、皮肤和胃肠中检测出原形,浓度范围为15.2-25.5 μg/kg肾脏居多；肝、肾、皮肤和胃肠中检测到QCA,浓度范围为20.2-36.1μg/kg各组织中均检测到Cyl,浓度范围为32.4-40.8μg/kg,胃肠最高。停药1 d,各组织中的原形和QCA均消除至定量限以下；除脂肪外各组织中均检测到Cy1,浓度范围20.5-36.8μg/kg,胃肠最高。停药3 d,仅胃肠道有少量的Cy1。停药7d各组织中检测不到任何代谢产物。综上所述,本实验首次建立喹赛多及其5种主要主要代谢产物在猪和鸡9种可食性组织,鱼6种可食性组织中的残留检测方法,同时,首次阐明了喹赛多及其代谢产物在这些组织中的消除规律,其研究结果为指导临床合理用药、药物安全性评价和残留标示物的确定提供了科学依据。