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天南星Arisaematis Rhizoma,2010版《中国药典》收载为天南星科Araceae天南星属Arisaema Mart.植物天南星Arisaema erubescens(wall.)Schott.、异叶天南星Arisaema heterophyllum B1或东北天南星Arisaema amurense Maxim.的干燥块茎。其味苦、辛,性温有毒,归肺、肝、脾经,具有燥湿化痰、散结消肿,外用治疔疮肿毒,蛇虫咬伤之功效。近年来,应用天南星配伍治疗肿瘤、冠心病等取得了较好的疗效。天南星药用历史悠久,为多基源药材,自古应用多混乱。本课题组曾修订了2010版《中国药典》一部天南星药材的质量标准,但未见有研究天南星药材指纹图谱的报道。夏佛托苷和异夏佛托苷分离自天南星,课题组曾就东北天南星中的夏佛托苷和异夏佛托苷在大鼠体内的药动学特征进行了初步研究,但有关天南星黄酮部位的药动学特征的研究尚未见有报导。本论文在文献研究及课题组前期工作基础上,采用HPLC法研究天南星药材的指纹图谱,超高效液相串联三重四级杆质谱(UPLC-MS/MS)研究了天南星黄酮成分的药动学特征,以期为药材质量地控制提供研究依据,为药效物质基础研究奠定基础。论文主要研究内容包括六个部分,具体如下：1.文献研究论文就中药指纹图谱和中药代谢动力学的研究进展,研究现状,研究方法和生物样品处理与检测方法等方面,进行了较为系统的综述。2.天南星药材HPLC(？)旨纹图谱研究论文采用HPLC法,以LichrospherC18(200mm×4.6mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(含0.1%乙酸)为流动相,流速1.0mL/min,梯度洗脱,270nm为检测波长,研究建立了天南星药材的指纹图谱。以腺苷为参照物,“2004A版中药色谱指纹图谱相似度评价系统”统计,11批次药材的相似度均达到0.9以上。采用高分辨质谱,并根据保留时间及紫外光谱,鉴定了腺嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤、尿苷、鸟苷、腺苷、夏佛托苷和异夏佛托苷8个共有指纹峰。比较虎掌南星、半夏的色谱图,结果显示有显著差别。3.大鼠血浆中夏佛托苷和异夏佛托苷同时测定方法的研究以甲醇沉淀蛋白处理血浆,采用UPLC-MS/MS,选择多反应检测模式(MRM),以夏佛托苷和异夏佛托苷的母离子m/z:563[M-H]-和二级碎片离子m/z:383[M-H-180]-、353[M-H-210]-作为检测离子,考察了两种流动相体系。色谱条件为：Sepax BR-C18(2.1mm×50μm)色谱柱；流速为0.3mL/min;柱温为40℃；20μL进样量。其一以甲醇-0.05%乙酸(25：75)为流动相,夏佛托苷和异夏佛托苷均在0.2～100ng/L内线性关系良好；其二以甲醇-0.05%乙酸(18：82)为流动相,夏佛托苷和异夏佛托苷均在1～200ng/mL内线性关系良好。内源性物质均不干扰样品测定。两方法的提取回收率均高于80%,日内、日间精密度的RSD%均小于6%,稳定性RSD%均小于3%。测定方法灵敏、快速,符合生物样品的分析要求。4.夏佛托苷和异夏佛托苷在大鼠体内的药动学特征研究Sprague-Dawley雄性大鼠以4mg/kg剂量分别灌胃给予夏佛托苷、异夏佛托苷及其混合物,12小时内眼眶取血分离血浆。甲醇沉淀法处理血浆,采用UPLC-MS/MS测定血药浓度,应用DAS2.0软件处理数据,单体和混合物给药的主要药动学参数Tmax、t1/2和Cmax依次为：夏佛托苷：1.167±0.376h和2.375±0.997h,2.3±0.756h和2.222±0.971h,33.259±3.912μg/L和57.711±26.78gg/L；异夏佛托苷：1.625±1.137h和2.375±0.997h,2.592±1.175h和2.345±0.853h,36.535±19.531μg/L和42.176±16.102μg/L。结果显示：夏佛托苷和异夏佛托昔混合物给药的峰浓度分别是单体的1.7倍和1.1倍,提示两种成分间对吸收可能存在相互影响。5.异叶天南星黄酮部位在大鼠体内的药动学特征研究药材以60%的乙醇提取,经AB-8树脂吸附,30%醇洗脱制备异叶天南星黄酮部位,并以HPLC法测定含量。以夏佛托苷为4.0mg/kg、T-Ⅱ为1.3mg/kg、T-Ⅳ为0.9mg/kg和异夏佛托苷为2.2mg/kg剂量灌胃给药,眼眶取血后分离血浆,甲醇沉淀法处理血浆,采用UPLC-MS/MS测定血药浓度,应用DAS2.0软件处理数据,各成分的主要药动学参数Tmax、t1/2和Cmax依次为：夏佛托苷：2.625±0.75h、3.455±1.70h和76.005±31.28μg/L;T-Ⅱ:1.875±0.75h、2.37±0.45h和40.684±23.50μg/L; T-Ⅳ:1.875±0.75h、2.601±1.27h和28.21±10.10μg/L；异夏佛托苷：2±0.71h、2.854±1.56h和51.801±19.74μg/L。比较夏佛托苷和异夏佛托苷在单体、混合物及部位给药的药动参数,结果显示成分间对吸收有相互影响。6.夏佛托苷和异夏佛托苷在大鼠体内的组织分布初步研究Sprague-Dawley雄性大鼠分别以4mg/kg剂量灌胃夏佛托苷和异夏佛托苷混合物,于给药后1.5h、2h、8h处死,取肝、心、脾、肺、肾各组织样品制备组织匀浆。以甲醇沉淀法处理,采用UPLC-ESI/Q-TOF MS测定组织药物浓度。结果显示药物在所采集组织中均有分布,在给药后1.5h以心中分布较少,肝、脾中浓度较高,肺、肾组织次之；2h以肝、脾组织中分布较高；8h肾中药物的浓度为最高,肝中次之,脾中药物浓度显著降低。