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真核翻译起始因子3(eukaryotic translation initiation factor 3, eIF-3)是真核细胞蛋白质翻译起始复合物中的一个因子,由13个亚基组成,在真核细胞翻译起始过程中发挥重要作用。近年来不断有报道表明eIF-3的多个亚基例如eIF3a、eIF3f等在多种肿瘤中有异常表达的现象,部分亚基的异常表达还与肿瘤的恶性生物学行为及预后相关,单独上调部分亚基的表达可以诱导细胞恶性转化。eIF3g是eIF-3的一个42kD的亚单位,在翻译起始过程中是eIF2、eIF5等其它翻译起始因子发挥作用的桥梁,并且还具有与细胞骨架蛋白4.1R和凋亡诱导因子AIF相结合的位点。本课题组在前期实验中,用双向电泳、质谱分析和Western blot等方法对比了人白血病K562细胞及其耐药株K562/ADR细胞、人乳腺癌MCF-7细胞及其耐药株MCF-7/ADR细胞两组细胞中eIF3g表达的差异,结果显示,耐药细胞株中的eIF3g的表达水平远远高于敏感细胞株,结合相关研究文献,我们推测eIF3g表达水平可能与肿瘤细胞的耐药性等恶性表型相关。为了探讨eIF3g表达和乳腺癌恶性表型的关系,本课题筛选出了过表达效果较好的外源性eIF3g稳定转染的乳腺癌Bcap37/eIF3g克隆,通过体内外实验研究其恶性生物学行为的改变；设计并构建可以靶向抑制eIF3g表达的人工microRNA表达载体,将其瞬时转染Bcap37细胞来进一步证实eIF3g的功能；利用免疫组化法检测乳腺癌临床标本中eIF3g的表达,分析其与临床病理参数的相关性。具体内容如下：1过表达eIF3g对乳腺癌Bcap37细胞的影响将通过筛选得到的稳定转染eIF3g的Bcap37细胞克隆进行Western Blot检测,挑选出了过表达效果较好的克隆命名为Bcap37/eIF3g。用MTT、FCM、划痕、transwell、动物实验等方法检测过表达转染组、空载体转染组和空白对照组细胞的增殖、细胞周期、迁移能力、侵袭能力、成瘤性和耐药性的差异。生长曲线结果显示Bcap37/eIF3g组的增殖速度明显高于对照组(P<0.05),动物实验表明Bcap37/eIF3g细胞的移植瘤的体积显著大于对照组(P<0.05),划痕实验和transwell结果显示eIF3g过表达后细胞的迁移和侵袭能力提高(P<0.01),FCM结果表明eIF3g过表达可以使Bcap37细胞的S期比例增高,G2/M期比例降低,IC50结果提示eIF3g过表达可以使Bcap37细胞对化疗药物阿霉素的耐药性增高(P<0.05),对长春新碱的耐药性降低(P<0.05),但对5-氟尿嘧啶和紫杉醇的耐药性没有影响。2抑制eIF3g表达对乳腺癌Bcap37细胞的影响将靶向抑制eIF3g表达的人工microRNA构建在pcDNA3.1(+)表达载体上,瞬时转染Bcap37细胞,并用MTT法和划痕试验检测抑制eIF3g表达对乳腺癌Bcap37细胞的生长和迁移能力的影响。Western blot结果表明构建的人工microRNA可以有效抑制eIF3g的表达,生长曲线结果显示转染microRNA的细胞组相比较对照组的增殖受到抑制(P<0.05),划痕结果表明抑制eIF3g的表达后细胞迁移能力降低。3免疫组化检测eIF3g的表达与临床参数的相关性应用免疫组化方法检测54例乳腺癌和10例乳腺良性疾病以及10例正常乳腺标本中eIF3g的表达,分析其与临床病理参数的相关性,结果表明在20位有淋巴结转移的病人中有13例(65%)为高表达,而在34位无淋巴结转移的病人中仅有7例(20.6%)为高表达(P<0.01)。同时检测23例在术前进行过化疗的病人,结合其对化疗药物的反应分析eIF3g的表达与病人的敏感性的关系,结果表明10例对化疗药物敏感的病人中eIF3g的表达水平均为低表达(P<0.05)。结论：1 eIF3g过表达能促进Bcap37细胞的增殖、迁移和侵袭,提高细胞周期的S期比例,降低G2/M期比例,并使Bcap37细胞对部分化疗药物产生耐药性；抑制其表达可以抑制Bcap37细胞的增殖和迁移。2免疫组化结果表明eIF3g的表达水平在有淋巴结转移的乳腺癌病人中较高,在对化疗敏感的乳腺癌病人中较低。