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第一部分白血病细胞株中Warburg效应的探讨目的：检测白血病细胞株中是否存在Warburg效应。方法：糖酵解抑制剂（2-DG）和氧化磷酸化抑制剂(oligomycinA：OA）分别作用于THP-1、K562、HL-60和NB4细胞株48h，采用MTT检测细胞的生长抑制率。乳酸测定试剂盒和葡萄糖测定试剂盒测定各细胞株在低血清的RPMI1640中葡糖糖的消耗和乳酸生成，及其两者的比值。结果：白血病细胞株的生长抑制对2-DG呈浓度依赖性，不同浓度的2-DG干预48h后发现NB4和HL-60细胞的生长抑制较明显，K562对2-DG作用不敏感。白血病细胞株的生长抑制对OA不成浓度依赖性，OA作用后48h后发现THP-1对OA敏感性较高，K562和NB4对OA敏感性较低。NB4对葡糖糖的摄取较其它细胞株更显著，且消耗的葡萄糖/生成的乳酸比值≈1/2。结论：NB4对糖酵解的抑制剂作用最敏感，且消耗的葡萄糖/生成的乳酸比值≈1/2，第二部分三氧化二砷在NB4中对miRNA-122的调节作用目的：检测三氧化二砷和全反式维甲酸作用于急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞后miRNA-122的表达变化。方法：采用实时定量PCR检测药物干预前后miRNA-122的表达。结果：1μmol/LATO和1μmol/L的ATRA作用于NB448h，实时定量PCR检测结果表明，ATO作用后miRNA-122的表达增高了4倍，ATRA作用后miRNA-122表达增高了1.2倍。结论：相同药物浓度作用下，ATO更能促进miRNA-122的表达。第三部分PKM2是miRNA-122靶基因目的：证实PKM2为miRNA-122靶基因，抑制miR-122能够解除对PKM2的负调控导致PKM2表达升高。方法：采用TargetScanHuman5.1软件预测miRNA-122和PKM2的结合位点，设计调取PKM23’UTR的引物序列和野生突变PKM23’UTR并扩增，将扩增的序列和psiCHECK-2载体连接并转化，采用阳离子脂质体法对转化质粒和miR-122模拟物、抑制剂和阴性对照分别共转染NB448小时后收集细胞，采用双荧光素酶检测系统对荧光素酶的活性进行检测。构建携带miR-122inhibitor的慢病毒并转染NB4细胞，用G418筛选稳定表达的NB4-mir-122inhibitor和NB4-NCinhititor细胞系，并利用实时定量PCR检测miR-122的表达。采用MTS和WesternBlot检测抑制miR-122表达后细胞PKM2的表达以及细胞的增殖能力。结果：PKM23’UTR质粒与miR-122共转染后荧光素酶活性下降有显著差异，mutPKM23’UTR-1质粒与miR-122共转染后荧光素酶活性下降无统计学差异，mutPKM23’UTR-2与miR-122共转染后荧光素酶活性下降有显著差异,mutPKM23’UTR-3（同时突变两个预测结合位点）与miR-122共转染后荧光素酶活性下降无统计学差异。成功构建并筛选出NB4-mir-122inhibitor和NB4-NCinhititor细胞系，通过检测发现抑制miR-122表达后细胞PKM2的表达升高，细胞的增殖能力增强。结论：实验通过双荧光素酶和蛋白水平证实PKM2是miRNA-122特异的靶基因，PKM2和miRNA-122两处结合位点中，第一处结合位点起关键作用，第二处结合位点起协助作用。miR-122在NB4中的低表达能通过增强Warburg效应促进肿瘤细胞增殖。