瘦叶带绿蝇在死亡时间推断中的应用及影响因素分析

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第一部分:瘦叶带绿蝇的生长发育规律及在死亡时间推断中的应用目的为了解决死亡时间推断这一难题,本课题对瘦叶带绿蝇在不同恒温条件下的生长发育进行研究,探讨瘦叶带绿蝇的生长发育规律,建立根据瘦叶带绿蝇进行死亡时间推断的模型,为法医学检案提供依据。方法本课题以瘦叶带绿蝇为研究对象,分别在16、19、22、25、28、31、34℃等七个恒温条件下对瘦叶带绿蝇幼虫进行培养,测量不同恒温条件下幼虫长度随生长发育的变化,统计不同温度条件下瘦叶带绿蝇不同发育标志(孵化、第一次蜕皮、第二次蜕皮、离食、化蛹、羽化)发育所需时间。根据不同温度条件下幼虫长度、发育历期分别建立用于死亡时间推断的长度等位线模型、历期等位线模型。根据不同阶段(卵期、一龄期、二龄期、三龄期、离食期、蛹期)的发育历期,通过线性回归分析,总结不同发育阶段的积温常数和发育起点温度,建立积温模型。结果不同恒温条件下瘦叶带绿蝇幼虫长度随生长发育均呈现出先升高后降低的趋势,温度越高,幼虫长度增长速率越快。不同发育标志发育所需时间随温度的升高而缩短,但当温度≥31℃时,化蛹时间、羽化时间有所延长。不同发育阶段的发育起点温度、积温常数被建立。瘦叶带绿蝇总发育历期要求发育起点温度为8.28±0.22℃,积温常数为5747.45±110.25h℃h。三个死亡时间推断模型被建立,即长度等位线法、历期等位线法和积温法。结论本研究首次对瘦叶带绿蝇在不同恒温下的生长发育进行研究,建立了瘦叶带绿蝇幼虫长度随生长发育变化的规律,总结出了不同发育阶段的发育时间。同时,该研究建立了应用瘦叶带绿蝇进行死亡时间推断的三个常用模型,可以使死亡时间推断更简单、更容易推广。本研究还发现≥31℃可能不是瘦叶带绿蝇的最优发育温度,当环境温度高于31℃时,我们利用瘦叶带绿蝇进行死亡时间推断时要非常谨慎。第二部分:波动温度对瘦叶带绿蝇生长发育的影响目的为了实现恒温条件下瘦叶带绿蝇的生长发育数据在波动温度(自然环境)中的应用,本课题对瘦叶带绿蝇在不同波动温度下的生长发育进行研究,同时与恒温条件下的生长发育数据相对比,探讨波动温度对瘦叶带绿蝇生长发育的影响,实现恒温下的生长数据在自然环境中的应用。方法本课题以瘦叶带绿蝇为研究对象,实验模拟自然环境建立三个波动温度(14~24)℃、(20--30)℃、(26-36)℃,分别对应平均温度为19℃、25℃、31℃。分别在三个波动温度条件下对瘦叶带绿蝇幼虫进行培养,测量波动温度条件下幼虫长度随生长发育的变化,统计波动温度条件下瘦叶带绿蝇不同发育标志发育所需时间。同时与相应恒温条件下瘦叶带绿蝇的研究结果相对比。结果在平均温度相同的情况下,波动温度与恒温条件下的幼虫长度生长变化趋势基本一致,但局部存在一定的差异。分别在波动温度和恒温条件下利用幼虫长度进行死亡时间推断,最大差异在6h以内。在平均温度为25℃时,波动温度下的总历期与恒温条件下的总历期没有明显差异。平均温度为19℃时,波动温度下的总历期比恒温下的总历期缩短51.96h。平均温度为31℃时,波动温度下的总历期比恒温下的总历期缩短20.04h。结论在平均温度相同的情况下,波动温度对瘦叶带绿蝇幼虫体长的生长发育存在一定影响,但影响程度较小,恒温条件下幼虫长度数据可以在波动温度环境中应用。在平均温度为25℃条件下,在波动温度下的总历期与在恒温条件下的总历期没有明显差异。而当温度过低、或过高时,波动温度下的总历期比恒温下的总历期呈现一定程度的缩短。第三部分:被迫离食对瘦叶带绿蝇生长发育的影响目的该部分对瘦叶带绿蝇幼虫在被迫离食情况下的生长发育进行研究,观察幼虫被迫离食后不同时间重新给予食物对幼虫发育历期的影响,探讨被迫离食对死亡时间推断的影响。方法本课题以瘦叶带绿蝇为研究对象,于幼虫不同发育时间(8h、20h、32h、44h、56h、68h)取样使其被迫离食,再于不同离食时间(3h、6h、12h等)重新给予幼虫食物,观察幼虫对食物的反应,统计被迫离食以及重新给食后幼虫化蛹时间、羽化时间及蛹重情况。结果一龄、二龄幼虫被迫永远离食后将停止发育,直至死亡;三龄幼虫被迫永远离食后可以继续发育、化蛹。一龄、二龄幼虫被迫永远离食时,幼虫存活时间随幼虫龄期的延长而延长;在死亡发生之前,幼虫重新得到食物将可以重新取食,并继续发育;但化蛹时间、羽化时间随重新取食时间的延长而延长,化蛹时间、羽化时间较正常对照组最大可延长89.76h、88.02h。未发育成熟的三龄幼虫被迫离食达到一定时间,将进展为不可逆的离食期,但其所形成的蝇蛹较正常蛹重小,其化蛹时间、羽化时间也较正常提前,化蛹时间、羽化时间较正常对照组最大可提前28.61h、52.56h。在温度一定的情况下,蛹期只与蛹重有关;蛹重越小,蛹期越短;蛹期最大可较正常对照组缩短23.95h。结论被迫离食是瘦叶带绿蝇的生长发育的一个影响因素。一龄、二龄幼虫被迫永远离食后将会死亡,未发育成熟的三龄幼虫被迫永远离食后可以化蛹,但蛹体积较小。被迫离食后再重新给食对幼虫发育历期存在一定影响,不同的被迫离食时间、重新给食时间均可导致不同程度的生长发育时间的延长。
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