O型口蹄疫病毒VP1蛋白的原核表达及反应原性检测

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiapehe
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
根据GenBank中已发表的FMDV毒林VP1的基因序列,设计并合成一对能扩增639bp基因片段引物,引物两端分别加BamH I和Not I酶切位点。用PCR的方法扩增得到VP1基因,将其克隆到pMD18-T Vector进行序列测定。用分子生物学软件对本试验测定的FMDV VP1基因序列与GenBank已公布的O型FMDV VP1基因序列进行同源性比较,结果显示扩憎到的VP1基因序列与GenBank已公布的O型FMDV VP1的基因序列的同源性较高均在93%以上,其中与CHA株、LAO林、MOG株和RUS株同源性在98%以上。对重组克隆质粒PTVP1进行双酶切得到639bp的目的片段,将其以正确阅读框架定向插入pET-32a(+)中,然后转化至E.colI BL21 DE3),于30℃以1mmol/L的IPTG诱导,发现VP1基因得到了高效表达,且表达产物分子量约为48KD。 将高效表达的目的蛋白经超声波裂解,取沉淀和上清分别进行可溶性分析,发现表达蛋白以包涵体的形式存在。表达的重纽蛋白变性、纯化、复性后,经蛋白免疫印迹(Western-Blot)分析和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,发现该融合蛋白具有较好的反应原性,为进一步研制口疫基因工程疫苗和诊断试剂盒奠定基础。
其他文献
一、概述为了保证提升人员的安全,《煤矿安全规程》第332条规定:升降人员或升降人员和物料的单绳提升罐笼(包括带乘人间的箕斗),必须装设可靠的防坠器。对防坠器的要求: 1、
在素质教育背景下,学生的主体地位得到了突出,以学生为中心开展教学可以促进教学质量的有效提升.在小学阶段的教学中,体育是非常基础的教学科目,体育教学的有效开展不仅可以
幼儿教师这份职业很平凡,说它平凡,是因为工作性质比较单调,成天就是和孩子打交道,没有什么轰轰烈烈的大师可干,日复一日年复一年.我作为一名幼儿教师,我从不这样认为,我觉得
伴随着课程改革的不断深入,如今乡土史课程资源的开发和应用已纳入中学历史教学,学生从中体会历史学习与生活实践之间的有机联系.在这个过程中,学生不仅能够培养学习历史学科
因为高中生自身兴趣爱好的不同,所以在选择运动项目的时候,也会有所差异.对于学生来说,选择一定的课外体育活动,能够让学生的体力得到有计划、有组织的增强,进而使得他们的体
摘 要:本文探讨了传统英语教学模式存在的弊端和制约大学生英语学习自主性的因素,证实了在大学英语教学中推行新的以学生为中心的自主学习方法的重要性,并提出了培养大学生自主学习的相应策略。  关键词:大学英语教学模式 自主学习 培养策略    一、在大学英语教学中推行新的以学生为中心的自主学习方法的必要性    1. 传统英语教学模式存在的弊端  目前仍然盛行的知识传授型教学模式以教师为中心、以完成教学
本文着重阐述了东桐峪金矿8号脉的矿柱形态、回采方法,技术经济指标,并简述了矿柱回采的实施措施及经济效益情况。经过多年的生产实践证明,此种矿柱回采方案对东桐峪金矿8号
在矿山的供水、供气、供风及尾矿砂的输送中使用了大量的管道。有的管道较长,又安装在露天。由于冬夏两季的温差较大,管道受冷热而产生伸缩,造成管道的两端联接口的对接困难
一、教态的定义与范畴    教态从字面上看,可指教师态度或体态的总称,也称作身体语言或体态语言,也可指非语言信号。所谓体态语言,就是用表情、眼神、手势、姿势、服饰等来表达某种意思的一种无声语言。行为科学告诉我们,几乎一切无声的语言,即体态语言,都可以作为人际间沟通的手段,都可以用来为教学服务。美国心理学家、哈佛医院儿童心理咨询部主任罗伯特·布鲁克斯曾说:“体态语言对于教师帮助学生保持长时间注意、便
在英语学习中,反复强调的四项基本技能是“听”、“说”、“读”和“写”。而在这四者中,“听”是排在第一位的,由此可见听力的重要性非同一般。据统计,人们在语言交际中45%的时间用于听,说占30%,读占16%,写占9%。因而要想学好一门外语,不仅要进行阅读和写作能力的训练,更要重视听说能力的培养。那么在英语学习中,如何有步骤、有方法地提升听力水平呢?本文就此做了简单的探索。    首先要克服紧张情绪,突