中药干预对模拟渡海作训大鼠神经内分泌、免疫系统的影响

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一、研究目的和意义   在前期实验中,通过建立大鼠模拟渡海作训模型,探讨了作战时的长时间高强度运动和心理应激对HPA轴和HPG轴形态和功能的影响。发现大鼠在模拟航渡后继续进行大强度模拟登陆作战训练,HPA轴明显亢进,而HPG轴受抑制;同时,垂体分泌功能也发生了相应的改变。应激虽是机体适应、保护机制的一个重要组成部分,但持久、过度的应激反应会造成机体严重损害,引起机体各个系统的紊乱,而对机体心血管、神经内分泌及免疫系统的危害更为显著。本实验在前期实验基础研究上,通过初筛选出的药物-红景天苷和三七总皂苷对模拟航渡及高强度运动雄性大鼠的干预,进一步研究这两种药物对模拟渡海作训模型大鼠神经、免疫、内分泌各项激素指标的变化,垂体、肾上腺、睾丸形态学改变以及垂体细胞分泌功能的变化,旨在探讨这两种药物对这一复合应激的影响及作用机制。   二、研究内容   第一部分抗应激药物的初步筛选   [目的]从相关药物中进一步筛选出安全有效且具有提高机体抗应激能力的药物。   [方法]30只SD大鼠随机分为5组:对照组(A组),植物甾醇组(B组)、三七总皂苷组(C组)、红景天苷组(D组)及淫羊藿苷组(E组)。每组大鼠递增负荷跑台训练10天,并分别给予生理盐水和相关药物灌胃1周后行跑台力竭运动,测定大鼠力竭运动时间。   [结果]红景天苷组力竭运动时间与对照组相比,差异具有统计学意义;三七总皂苷及植物甾醇也能明显延长大鼠运动力竭。   第二部分中药干预对模拟渡海作训大鼠神经内分泌及免疫系统的影响   [目的]通过红景天苷、三七总皂苷对模拟航渡及高强度运动大鼠的干预,观察干预后大鼠激素水平,垂体、肾上腺和睾丸的病理学的改变及垂体分泌功能变化。   [方法]将6周龄的SD雄性大鼠随机分为静息对照组(QC组)、训练对照组(TC组)、红景天苷训练组(ST组)和三七总皂苷训练组(PNS组),每组10只。QC组不接受任何刺激,在生理盐水灌胃1周后即进行取样。其余3组大鼠经过10d递增负荷跑台训练,分别给予生理盐水、红景天苷、三七总皂苷灌胃1周后,进行模拟航渡及高强度运动,结束即刻取血,使用放免法测定大鼠血清相关的神经内分泌、免疫激素;HE染色光镜下观察垂体、肾上腺及睾丸组织病理结构;电镜下进一步观察细胞超微结构及采用免疫组织化学方法观察垂体分泌功能。   [结果]   (1)TC组大鼠与QC组相比,血清Cort、β-EP水平显著升高,而Tes明显下降;灌服红景天苷后与TC组相比,血清T水平显著增高,但外周血中GnRH和LH水平均仍呈下降趋势,以GnRH下降明显。同时,ST组大鼠的NPY、IL-1β和IL-6水平水平较TC组显著降低;同样,PNS组与TC组相比,血清Cort和NPY水平下降具有统计学意义,GnmRH和IL-6也呈显著下降趋势。   (2)HE染色示各组大鼠的垂体、肾上腺及睾丸组织病理无明显变化。   (3)电镜检查示TC组垂体细胞胞浆中分泌颗粒显著减少,而ST组与PNS组胞浆中分泌颗粒的数目均明显增多,凋亡细胞减少;经过复合应激后的大鼠肾上腺皮质束状带细胞可见散在的凋亡细胞,脂滴、脂质空泡较QC组少见,ST组大鼠肾上腺细胞线粒体结构正常,脂质空泡的数量与QC组无明显变化,但可见较多凋亡细胞,而PNS组大鼠肾上腺皮质细胞胞浆丰富,脂滴、脂质空泡较多,线粒体结构接近正常;TC组睾丸Leydig细胞线粒体肿胀,嵴减少或消失,ST组与PNS组Leydig细胞中线粒体结构趋向于正常,可见散在大小不等深染的分泌颗粒。   (4)QC组垂体ACTH阳性细胞染色深,阳性反应细胞半定量为3+,TC组ACTH阳性细胞数量比QC组明显减少,半定量为+,ST组、PNS组,ACTH阳性细胞染色较深,阳性反应细胞数量均介于QC组及TC组之间;QC组垂体NPY阳性细胞染色较深,阳性反应细胞数量半定量为3+,TC组垂体NPY免疫染色切片中未见NPY阳性细胞,表达为阴性,ST组和PNS组NPY阳性细胞数量与QC组相比没有明显差异。   [结论]   (1)负性心理应激及大强度的运动训练使大鼠神经-内分泌-免疫网络功能紊乱,且抑制HPG轴的功能;   (2)红景天苷对HPG轴具有保护作用;   (3)PNS对神经-内分泌-免疫网络具有调控作用。   第三部分中药干预后大鼠力竭运动时间分析   [目的]探讨红景天苷和三七总皂苷对应激状态下大鼠抗疲劳的效果。   [方法]36只SD大鼠随机分为3组:对照组,红景天苷组、三七总苷组。每组大鼠递增负荷跑台训练10 d,并分别给予生理盐水和相关药物灌胃1周后行跑台力竭运动,测定大鼠力竭运动时间。   [结果]红景天苷给药组力竭运动时间与对照组相比,差异具有显著性统计学意义。   [结论]红景天苷能显著提高应激状态下大鼠的运动耐力。
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