Livin、Bcl-2在人大肠癌组织和细胞中的表达及枸杞多糖的干预作用

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目的:(1)通过检测Livin、Bcl-2蛋白在大肠癌组织、腺瘤组织和正常大肠粘膜组织中的表达,探讨Livin、Bcl-2在大肠癌组织中表达及两者表达的相关性;(2)通过分析大肠癌组织中Livin、Bcl-2表达与大肠癌临床病理参数的关系,探讨Livin检测辅助判断大肠癌恶性程度和进展情况的可能性;(3)分析枸杞多糖作用大肠癌细胞后,对该细胞抑制情况,并探讨枸杞多糖抑制大肠癌细胞Livin、bcl-2蛋白表达的可行性。方法:(1)采用免疫组织化学(SABC)法检测大肠癌组织、腺瘤组织、正常大肠粘膜组织中Livin蛋白和Bcl-2蛋白的表达; (2)通过MTT法检测枸杞多糖对大肠癌细胞的抑制作用; (3)用DNA-Ladder法检测细胞凋亡情况;(4)Western-blotting法检测药物作用细胞后其蛋白表达情况。结果:(1)Livin蛋白在正常大肠粘膜组织和腺瘤中均未表达,Livin蛋白在大肠癌组织中阳性率为50.00%(17/34)。Bcl-2蛋白在正常大肠粘膜、大肠腺瘤组织和大肠癌组织中阳性表达率分别为12.50%(1/8)、80.00%(8/10)和58.82%(20/34)。大肠癌组织中Livin蛋白高表达与正常大肠粘膜组织、大肠腺瘤息肉的差异显著(P﹤0.05)。Bcl-2蛋白在大肠癌和腺瘤组织中高表达,在正常大肠粘膜组织中低表达。大肠癌中Bcl-2蛋白高表达与正常大肠粘膜组织有显著差异(0.025﹤P﹤0.05) ,与大肠腺瘤组织无显著性差异(P﹥0.05)。(2)Livin蛋白的表达与大肠癌患者的年龄、性别、Dukes分期及淋巴结转移均无明显相关关系(P﹥0.05),而与肿瘤分化程度和浸润深度明显相关(P<0.05)。Bcl-2蛋白的表达与大肠癌患者的年龄、性别、分化程度、Dukes分期及淋巴结转移均无明显相关关系(P﹥0.05),而与肿瘤浸润深度明显相关(P<0.05)。(3)枸杞多糖作用大肠癌细胞后与空白组比较除100ug/ml组(P﹥0.05)外,其余各组均有显著性差异(P<0.05)。(4)DNA-Ladder法检测到细胞凋亡条带。(5)Western-blotting法检测枸杞多糖作用细胞后其蛋白表达量与空白组比明显减少。结论:①Livin蛋白在大肠癌组织中高表达,而在正常大肠粘膜和腺瘤组织中不表达。Livin蛋白的表达与大肠癌患者的年龄、性别、Dukes分期及淋巴结转移均无明显相关关系(P﹥0.05),而与肿瘤分化程度和浸润深度明显相关(P<0.05)。②Bcl-2基因在大肠癌和腺瘤组织中高表达,在正常大肠粘膜组织中低表达。Bcl-2基因的表达与结直肠癌患者的年龄、性别、分化程度、Dukes分期及淋巴结转移均无明显相关关系(P﹥0.05),而与肿瘤浸润深度明显相关(P<0.05)。③大肠癌组织中Livin蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关(P<0.01)。④大肠癌中Livin、Bcl-2蛋白与肿瘤细胞增殖有关。⑤枸杞多糖能抑制肿瘤细胞生长。⑥枸杞多糖能抑制大肠癌细胞Livin、Bcl-2蛋白的表达,促使肿瘤细胞发生凋亡。
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