不同茶树品种中黄酮苷含量的测定

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茶叶中含有丰富的黄酮类物质,多与糖结合形成黄酮苷类物质,主要为杨梅素苷、槲皮素苷、山奈酚苷和芹菜素苷;部分以游离苷元形式存在,即杨梅素、槲皮素和山奈酚。黄酮及黄酮苷类物质是茶叶多酚的重要组成成分,与茶叶品质密切相关,是茶汤中主要的涩味物质,且是构成汤色色泽的重要因子。本研究建立了一种茶叶中黄酮醇及黄酮苷类物质的LC-MS检测分析方法,并利用该方法检测、分析了不同生长时期芽叶中黄酮醇及黄酮苷类物质含量的变化规律,并对不同茶树品种中黄酮醇、黄酮苷类物质的含量分布作了初步探讨。结果表明:1. LC-MS分析方法为:流动相A相(乙腈:乙酸:水,3:0.5:96.5, v:v:v), B相(乙腈:乙酸:水,30:0.5:69.5,v:v:v);梯度洗脱程序为30min内,B相从20%线性增加到60%,40min时增至65%,50min时增至67.5%,75min时增至80%;流速为1ml/min;进样量20μl;检测波长为360nm;柱温为25℃。质谱条件为ionization mode:API-ES; polarity:positive and negative; mass range:100-1000m/z; fragmentor:100V; dying gas flow:12-13L/min; nebulizer pressure:50-60psig; dying gas temperature:350℃; capillary voltage:3500V.结合双波长检测技术,可同时检测、分析茶叶中的儿茶素类物质(280nm)、黄酮及黄酮苷类物质(360nm),互不干扰,分离效果好。2.不同生长时期芽叶中,槲皮素、杨梅素和山奈酚三种黄酮醇苷元含量极低,有的甚至检测不出;而黄酮苷类物质的含量因芽叶生长时期不同而分布广泛。不同生长时期芽叶中,杨梅素苷、芹菜素苷和槲皮素苷总量随芽叶成熟度增加呈逐渐增长趋势,其中槲皮素苷含量最高,占黄酮苷总量一半左右;山奈酚苷总量变化趋势与这三类不同,呈先增长后减少趋势。随着芽叶成熟度增加,黄酮苷总量、黄酮类物质总量也均呈逐渐增长趋势,黄酮类物质中黄酮苷总量所占比例为60%-85%。3.18个不同茶树品种中,槲皮素、杨梅素和山奈酚三种黄酮醇苷元含量极低,而黄酮苷含量分布广泛,以槲皮素苷为主,占黄酮苷总量一半左右,其次为山奈酚苷;9个绿茶适制性茶树品种中,日本菽北品种中黄酮苷总量最高达7.41mg/g,乌牛早品种中含量最低为6.03mg/g,存在显著性差异;4个红茶适制性茶树品种中,浙农25品种中黄酮苷总量最高达9.53mg/g,政和大白茶品种中含量最低为7.46mg/g,存在显著性差异;5个乌龙茶适制性茶树品种中,凤凰水仙品种中黄酮苷总量最高为9.20mg/g,福建水仙品种中含量最低为3.88mg/g,存在显著性差异。红茶适制性茶树品种和乌龙茶适制性茶树品种(除福建水仙外)的黄酮苷含量较绿茶适制性茶树品种高;黄酮类物质中黄酮苷总量所占比例为70%-90%。
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