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目的:阐明苦参主要成分苦参碱对皮肤病常见致病菌的抗菌范围,苦参碱与黄连、黄柏主要成分盐酸小檗碱联合运用后对致病菌的作用,为中药苦参、黄连、黄柏在临床中的使用提供中药药理的研究支持,为中药新药研发中的联合用药提供试验依据。 方法:采用连续二倍梯度稀释法测定苦参碱对8种细菌标准实验菌株及2种真菌标准实验菌株的最小抑菌浓度(MIC),使用平板转种法测定其最小杀菌浓度(MBC)。同样方法检测盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白假丝酵母菌标准实验菌株的 MIC、MBC。按照微量棋盘稀释法设计,测定不同浓度组合的苦参碱与盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、白假丝酵母菌的MIC和MBC,并根据部分抑菌浓度指数FICI计算方法,判定苦参碱与盐酸小檗碱对实验菌株的联合效应。 结果: 1.苦参碱对大肠埃希氏菌、绿脓假单胞菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、粪链球菌、普通变形杆菌、奇异变形杆菌、白假丝酵母菌、糠秕状鳞癍癣菌(马拉色菌)的MIC(mg/ml)分别为:10、20、20、20、2.5、20、10、10、10、20;对上述实验菌株的MBC(mg/ml)分别为20、20、40、40、10、40、40、20、10、20。 2.盐酸小檗碱对金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的MIC(mg/ml)分别为:0.625、0.625;对上述实验菌株的MBC(mg/ml)分别为2.5、2.5。因为盐酸小檗碱最大溶解度是20mg/ml,在本实验中这个浓度对大肠埃希氏菌无抑菌及杀菌作用。 3.不同浓度的苦参碱与盐酸小檗联合应用后,测得的MIC与MBC与两种药物单独使用时的MIC、MBC相比较,浓度显著降低。联合应用后苦参碱对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的MIC(mg/ml)分别为2.5、5、0.3125;盐酸小檗碱对上述标准菌株的MIC(mg/ml)分别为1.25、0.039、0.156。根据部分抑菌浓度指数FICI计算方法(FICI=MICA/MICa+MICB/MICb),苦参碱与盐酸小檗碱联合应用后,对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌的FICI值分别为0.31、0.31、0.28。当FICI≦0.5时,两药具有协同作用,以此判定苦参碱与盐酸小檗碱联用对三种实验菌株抗菌关系为协同。 结论:苦参碱具有广谱的抗菌作用;苦参碱和盐酸小檗碱联合应用对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、白假丝酵母菌抗菌关系为协同。