高盐样品中锌离子的选择性掩蔽及瞬间等速毛细管电泳

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在利用瞬间等速毛细管电泳分析高盐生理样品中的微量金属离子(镍、铁等)时,通过在背景电解质溶液中加入适量的巯基乙酸(TGA),成功地实现了动态消除高浓度锌离子的干扰。在此过程中,微量镍、铁离子与4—(2—吡啶偶氮)间苯二酚(PAR)络合后通过瞬间等速毛细管电泳分别被有效地富集在很窄的区带中。由于过量的锌离子被巯基乙酸掩蔽,没有对镍、铁离子的富集产生影响。镍、铁—PAR络合物的瞬间等速毛细管电泳的富集是通过在样品溶液中引入氯离子作为前导电解质,过量的PAR作为终结电解质来构建瞬间等速毛细管电泳而实现的。在电泳过程中,高浓度的锌离子被巯基乙酸选择性地、动态地从样品区带中掩蔽,从而达到了消除其干扰的目的。优化的背景电解质溶液的组成为:95mM N—三(羟甲基)甲基—3—氨基丙磺酸(TAPS),0.1mM PAR,2mM巯基乙酸和0.02%体积比的FCPN(一种氟炭中性聚合物表面活性剂);用三乙基氨(TEA)调节电解质溶液至酸度为pH9.0。利用本方法,在存在高浓度锌离子的高盐溶液中,镍、铁—PAR络合物通过瞬间等速毛细管电泳的富集后,其紫外吸收响应信号比正常的毛细管电泳进样模式的紫外吸收响应信号提高了几百倍。设信噪比(S/N)为3时,镍、铁离子的检测限分别为0.2ppb和0.3ppb。本方法已成功地用标准参考尿样证实了其可行性,并测定了人尿中镍、铁离子的浓度。
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