【摘 要】
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藻蓝蛋白(Phycocyanin PC)是蓝藻进行光合作用的重要捕光色素。根据来源不同,一般分为C-藻蓝蛋白(C-PC)和R-藻蓝蛋白(R-PC)两种。藻蓝蛋白由α和β亚基组成,天然状态下,大多
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藻蓝蛋白(Phycocyanin PC)是蓝藻进行光合作用的重要捕光色素。根据来源不同,一般分为C-藻蓝蛋白(C-PC)和R-藻蓝蛋白(R-PC)两种。藻蓝蛋白由α和β亚基组成,天然状态下,大多数以(αβ)3或(αβ)6等杂聚体形式存在。研究表明,藻蓝蛋白具有众多的生物学功能,而且在肿瘤的光动力治疗中具有巨大的潜力。 由于藻蓝蛋白作为光敏剂应用有生物体内不稳定,靶向性不高等缺点,所以要为藻蓝蛋白设计一种靶向制剂。利用脂质体作为藻蓝蛋白的载体,可以提高细胞亲和性,脂质体经过适当修饰可以实现靶向给药和控制释放,且无毒无免疫源性体内可降解。 本课题旨在分离纯化获得藻蓝蛋白亚基,然后建立藻蓝蛋白亚基脂质体的制备方法,并检测藻蓝蛋白亚基脂质体对肿瘤细胞光动力杀伤效果。 采用薄膜水合—超声分散法制备藻蓝蛋白亚基脂质体,荧光显微镜观察藻蓝蛋白亚基脂质体的细胞转染,MTT法检测藻蓝蛋白亚基脂质体体外肿瘤细胞光动力杀伤效果。结果显示脂质体的粒径大约在100-150nm,包封率为42.3±1.8%;在浓度为100μg/ml时,藻蓝蛋白亚基脂质体转染率在2h达到17.4%,4h到22.1%,5-6h转染率基本保持不变。肿瘤细胞光动力杀伤实验显示,随着藻蓝蛋白亚基脂质体浓度的增加,对细胞的PDT作用增强,在200μg/ml时,BGC-823和S180细胞生存率分别降为52%和40%,当藻蓝蛋白亚基脂质体和藻蓝蛋白亚基有效药物浓度相同时,其对肿瘤细胞光敏作用基本相同。通过薄膜水合—超声分散法制备的藻蓝蛋白亚基脂质体可以很好保持藻蓝蛋白亚基的生物活性,相同蛋白浓度时,藻蓝蛋白亚基脂质体可以比藻蓝蛋白亚基更快地转染进肿瘤细胞,充分转染后(4h),光动力杀伤效果基本相同,且保持了与藻蓝蛋白亚基类似的PDT作用效果。S180荷瘤小鼠光动力治疗效果显示,在其他条件相同情况下,PEG-DSPE修饰藻蓝蛋白亚基脂质体介导的光动力治疗中,肿瘤抑制率达到61.3%,而未经PEG-DSPE修饰藻蓝蛋白亚基脂质体,肿瘤抑制率只有51.1%。
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