背景:表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs),在晚期非小细胞肺癌(Non-Small CellLungCancer,NSCLC)的治疗中占据了十分重要的地位。然而,原发以及快速发生的获得性耐药导致EGFR-TKIs在NSCLC的治疗中遭遇了诸多困境。因此,寻找能够有效增敏EGFR-TKIs或逆转NSCLC耐受EGFR-TKIs的方法具有重要的临床意义。而作为介导细胞自噬、能量感应、氧化应激等多个信号通路的关键配体蛋白SQSTM1在肿瘤的发生发展及耐药中均发挥了非常重要的作用,但SQSTM1是否也参与调控肺癌细胞耐受EGFR-TKIs的过程尚未见报道。目的:探讨EGFR-TKIs是否引起SQSTM1的表达变化及其可能机制,揭示SQSTM1在NSCLC EGFR-TKIs耐药中的作用,为临床上逆转NSCLC等恶性肿瘤的EGFR-TKIs耐药提供理论依据。方法:利用 western blot 研究 EGFR-TKIs(Gefitinib、Erlotinib 和 AZD9291)对 SQSTM1的表达调控作用、敲减SQSTM1联合EGFR-TKIs引起的凋亡蛋白的表达变化、EGFR-TKIs对自噬相关蛋白的调控作用;运用MTS实验验证敲减SQSTM1对EGFR-TKIs的增敏作用、过表达SQSTM1引起的EGFR-TKIs抵抗;通过流式细胞术分析敲减SQSTM1联合EGFR-TKIs对肺癌细胞凋亡的影响;通过转染siRNA或质粒的方法研究敲减或过表达SQSTM1对EGFR-TKIs杀伤NSCLC敏感性的影响;利用定量PCR检测EGFR-TKIs处理非小细胞肺癌后对SQSTM1 mRNA水平的影响;利用免疫荧光技术检测EGFR-TKIs对自噬状态以及溶酶体功能的影响。结果:EGFR-TKIs(Gefitinib和AZD9291)以浓度梯度和时间梯度依赖的方式上调SQSTM1的蛋白水平,敲减SQSTM1可以通过诱导凋亡而明显增敏EGFR-TKIs对NSCLC的杀伤效果,而过表达SQSTM1则会提高NSCLC对EGFR-TKIs(Gefitinib 和 AZD9291)的耐受。我们研究发现,EGFR-TKIs(Gefitinib 和 AZD9291)对SQSTM1的转录水平没有明显影响,而是通过阻断细胞自噬来抑制其蛋白降解而上调其水平。我们进一步研究发现,EGFR-TKISs(Gefitinib和AZD9291)并未阻断自噬体的形成及自噬体与溶酶体的融合,而是通过抑制溶酶体的功能来抑制细胞自噬。结论:EGFR-TKIs(Gefitinib和AZD9291)通过抑制溶酶体功能来阻断自噬过程,从而抑制SQSTM1通过自噬途径的降解,由此引起的SQSTM1的高表达导致NSCLC产生EGFR-TKIs(Gefitinib和AZD9291)耐药,而敲减SQSTM1可以明显增加EGFR-TKIs(Gefitinib 和 AZD9291)对 NSCLC 的杀伤效果。