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目的:应用细胞学、药理学、分子生物学等体内外实验研究光热治疗、PD-1抗体药物治疗以及光热治疗协同PD-1抗体治疗小鼠肝癌的治疗效果;构建级联双重靶向脂质体,研究光热治疗对PD-1结合位点PD-L1表达的影响,探究光热治疗协同PD-1抗体治疗的及机制。方法:1.构建H22肝癌balb/c荷瘤鼠模型,平行分组,设置空白组、光热治疗组、手术组对小鼠肿瘤进行治疗。利用流式细胞分析术、免疫荧光分析小鼠肿瘤组织内CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润情况。2.利用免疫印记分析、Q-PCR、免疫组化分析在不同治疗后,体外肿瘤细胞以及小鼠肿瘤组织内PD-L1表达情况,以及IFN-γ表达情况。3.利用流式分析术,分析小鼠肿瘤微环境内CD38表达对T细胞杀伤毒性的评价。4.构建级联双重靶向肿瘤微环境响应热敏脂质体载药系统,对级联双重靶向肿瘤微环境响应热敏脂质体载药系统进行表征。5.对H22荷瘤鼠进行分组治疗,记录分析小鼠肿瘤体积变化、小鼠存活率、脏器毒性情况。6.对4T1荷瘤鼠进行分组治疗,记录分析小鼠肿瘤体积变化、小鼠存活率、肺转移情况。结果:1.通过流式细胞分析术、免疫荧光实验结果表明,与空白对照组、手术组进行比较,光热治疗组的小鼠肿瘤微环境内的CD4+T细胞、CD8+T细胞浸润明显升高。2.通过免疫印记分析、Q-PCR、免疫组化实验结果表明,与空白对照组比较,经光热治疗刺激后,体外肿瘤细胞表达PD-L1明显增多。小鼠肿瘤组织内PD-L1表达明显升高,IFN-y表达明显升高。3.通过流式细胞术分析结果表明,与其他治疗组比较,CD38表达降低,可增强T细胞毒性,增强anti-PD1的疗效。4.构建载体后对H22荷瘤鼠以及4T1荷瘤鼠进行治疗后,实验结果表明,载体协同PD-1抗体治疗效果相对于其他治疗组更佳。结论:光热治疗后会通过刺激肿瘤微环境内免疫细胞浸润,提高肿瘤微环境内PD-L1表达水平,抑制肿瘤微环境内CD38表达,进而提高与PD-1抗体的协同治疗效果。