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因抗生素在饲料中的过度使用而导致的耐药性、毒性残留等一系列安全性问题越来越引起人们的重视,寻找安全的抗生素替代品迫在眉睫。芽孢杆菌制剂不仅能够抑制肠道病原菌的生长,提高动物生产性能,而且会形成芽孢,对逆性环境具有很强的耐受力,因此在饲料业中具有广阔的应用前景。本课题是对实验室保藏的一株枯草芽孢杆菌CCAM 080032展开研究,通过研究其在逆性环境的体外耐受能力以及产酶情况来评价其益生特性。然后,从培养基和培养条件等方面对该菌株的固态发酵工艺进行优化,以期获得较佳产孢条件,具体研究结果如下:1、耐受性试验表明,枯草芽孢杆菌CCAM 080032能够耐受14%.NaCl的高渗压,人工胃液、人工肠液以及胆盐对芽孢的存活率几乎没有影响,并且具有较强的耐热能力,当处理温度≤80℃时,芽孢存活率仍可以维持在90%以上。2、枯草芽孢杆菌CCAM 080032固态发酵的物料具有蛋白酶活性、木聚糖酶活性和纤维素酶活性,其中中性蛋白酶活力为107.70 U/g,碱性蛋白酶活力为888.52U/g,木聚糖酶活力为20.28 U/g,纤维素酶活力为8.99 U/g。这三种酶的存在,有助于饲料中营养物质的消化吸收,促进动物的生长,降低饲料成本,提高养殖效益。3、通过单因素试验及正交试验方法,确定了枯草芽孢杆菌CCAM 080032(?)勺最优培养基与最佳培养条件为:稻草粉200 g,麸皮800 g,葡萄糖50 g,胰蛋白胨20 g,NH4NO315 g, KH2PO4 10 g, H2O 1500 g,按5%的比例接种菌龄为17h的种子液,在37℃培养48 h后,芽孢产量可达到7.90×1010CFU/g。4、将发酵过程起始温度设为37℃,同时控制过程中最高温度不超过45℃,最好保持37℃,并对物料进行适当的翻动,可以得到较高的芽孢产量。这一结论对于枯草芽孢杆菌的实际生产具有指导意义。5、应用转盘发酵得到的芽孢产量为1.06×1010CFU/g,应用通风发酵罐得到的芽孢产量为1.85×1010 CFU/g,利用传统的浅盘发酵方式可以得到11.09×10mCFU/g芽孢,因此,浅盘发酵具有绝对优势,转盘发酵设备还需改进。