铜绿假单胞菌NY3降解多环芳烃的特性研究

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多环芳烃是一类具有致畸、致癌、致突变的有机污染物。疏水性特点使其在环境中长期存在,难以去除。随着现代工业的迅速发展,多环芳烃对环境造成的污染日益加剧,所以快速有效的去除环境中的多环芳烃一直成为研究热点。针对实验室保存的一株能降解多环芳烃的铜绿假单胞菌NY3,本论文展开研究,旨在掌握能提高该菌降解多环芳烃的共代谢碳源,并掌握其降解多环芳烃的途径。首先有目的选择作为共代谢碳源的物质:作为种子液制备碳源LB肉质培养基,菲为多环芳烃代表,葡萄糖为微生物生长刺激素,水杨酸、原儿茶酸、邻苯二酚、邻苯二甲酸等为多环芳烃常见的代谢产物,脂肪烃是最常见的与多环芳烃污染物共存的物质。研究了NY3菌在上述物质上的生长特点,对NY3菌降解菲的能力诱导和促进作用;并利用GC MS鉴定铜绿假单胞菌NY3对菲的降解转化产物,推测降解机理,揭示中间产物的积累状况。获得以下研究成果:(1)以各种碳源生长时,NY3菌最大生长量时菌细胞对菲的降解活性最高。其中LB为碳源生长获得的菌细胞活性最大,菲和邻苯二酚次之,葡萄糖、原儿茶酸、水杨酸、邻苯二甲酸等碳源生长的菌细胞降解菲的活性最下等。NY3菌细胞量最大时收获菌,以LB培养基生长时,菌细胞60min内对菲的降解率约为46.26%。以菲、邻苯二酚为碳源生长时,菌细胞60min内对菲的降解率分别约为8.99%和8.97%,而以葡萄糖、原儿茶酸、水杨酸、邻苯二甲酸等碳源生长,相同条件下菲去除率仅分别为3.54%、7.07%、5.96%、4.01%。(2)以LB培养基生长的NY3菌细胞在降解菲时,Fe2+对于最大生长量所收获的菌细胞降解菲具有明显的促进作用。铁离子对生长17h菌细胞30min内菲的降解率可提高14.37%。生长的初期和衰亡期的细胞对菲的降解活性小,且Fe2+对其活性无明显的促进作用。(3)烷烃作为共代谢碳源对NY3菌降解菲、蒽有明显的促进作用,但是对于芘的降解效率有抑制作用:与以菲为单一碳源相比,外加正辛烷、正十二烷、正十六烷等,细胞生长量明显提高,生长48h NY3菌对菲同步降解率分别提高34%、38%和42.65%;在含蒽的体系中,外加正辛烷、正十二烷、正十六烷等,细胞生长量也明显提高,生长48h NY3菌对蒽的同步降解率分别提高了40.18%、15.27%和53.57%。对于芘,生长48h芘的同步去除率则分别降低了28.44%、14.79%和29.1%。(4)铜绿假单胞菌NY3降解菲的过程中产生的主要代谢产物有苯甲酸、水杨酸、α萘酚、1羟基2萘酸、邻羟基苯基羰基乙酸等,其中1羟基2萘酸是最易积累的中间产物。而邻羟基苯基羰基乙酸是首次被报道的铜绿假单胞菌降解菲的中间产物。NY3菌能以上述产物为唯一碳源和能源生长。尽管1羟基2萘酸是NY3降解菲时最易积累的代谢产物。但NY3菌仍能以1羟基2萘酸为碳源缓慢生长,且NY3降解1羟基2萘酸能转化为α萘酚、水杨酸、苯甲酸等产物。
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