睾丸组织移植与冷冻保存对于动物种质资源的保存具有重要的意义,在拯救濒危物种上也具有重要的应用价值。该项技术可以保存睾丸组织细胞的完整性和内分泌功能。雄性睾丸中存在有精原干细胞,它是雄性生殖能力保存和恢复的保障。睾丸移植后可产生成熟的精子,若在治疗前对睾丸组织进行冷冻保存,即可为肿瘤患者生殖能力的保存提供新选择。在动物保护领域,有价值的动物在未成年前的死亡所造成的基因多样性的缺失也是一个严重的问题。睾丸组织移植与冷冻保存有望使死亡动物的睾丸重新获得产生精子的能力。通过比较异位移植后回收的睾丸与供体睾丸的基因表达,已经证实睾丸移植可保存供体睾丸微环境的完整性,促进精子发生。通过睾丸组织移植可获得未成年死亡动物的精子,但睾丸组织移植前的冷冻保存手段尚不完善。本研究通过比较不同部位的睾丸组织移植、不同的移植受体和不同的移植生长时间对组织移植效果的影响,以期筛选出适宜的睾丸组织移植条件；通过比较不同浓度DMSO和不同的降温方法研究睾丸组织冷冻保存的效果。1.睾丸组织移植试验本试验以5日龄C57B6/J小鼠睾丸为研究对象,研究影响睾丸移植的多种因素,包括移植部位、受体和移植时间等,以期筛选出最佳的睾丸移植条件。结果显示：(1)不同移植部位对移植睾丸生殖细胞分化的影响差异显著。睾丸白膜内移植后分化情况最好与假移植对照组相似；背部皮下移植后睾丸的分化率为29.2%；肾包膜下移植则未见分化。(2)移植受体裸鼠8周后分化情况优于C57BL/6J小鼠受体组(P<0.01)。(3)移植受体裸鼠10周后分化效果优于受体裸鼠8周组(P<0.05)。研究结果表明：(1)睾丸白膜内最利于睾丸组织移植后精子的发生；背部皮下移植是睾丸移植的次优选择；肾包膜下不适用于小鼠的睾丸组织移植。(2)睾丸组织移植于受体裸鼠,效果要好于同品系受体；(3)将睾丸移植后生长时间从8周延长到10周,更有利于生殖细胞的分化。2.睾丸组织冷冻保存试验本试验以5日龄C57B6/J小鼠睾丸为研究对象,通过比较睾丸细胞核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)阳性率,分析不同DMSO浓度和冷冻程序对睾丸组织冷冻效果的影响,并通过冷冻睾丸组织移植进一步验证冷冻效果。结果显示：(1)冷冻管投入液氮前,-20℃降温、液氮蒸汽降温和冷冻盒-80℃降温3组的PCNA阳性率差异显著；以冷冻盒-80℃保存效果最好。(2)使用不同浓度DMSO冷冻保存睾丸组织,对PCNA阳性的影响差异显著。最佳的DMSO浓度为l0%,此浓度冷冻保护效果明显优于5%和15%浓度组。(3)冷冻睾丸和新鲜睾丸移植后的生殖细胞分化情况差异不显著。本试验表明,选用10%DMSO做冷冻保护剂,投入液氮前使用冷冻盒在-80℃冰箱降温,可获得较好的睾丸组织冷冻保存效果,复苏后睾丸组织移植的效果可达到新鲜睾丸移植的效果。