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糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是与糖代谢相关的慢性微血管并发症,其发病率高且后果严重。传统中医药以整体调节、辨证论治的方法治疗DN具有独特的优势,可有效延缓DN进程。但是目前具有良好疗效的中药成方制剂品种仍然较少,因此研制开发具有DN治疗作用的中药制剂有重要意义。固肾解毒胶囊(Gushen Jiedu Capsule,GSJD)是根据医疗机构协定处方固肾解毒方研制而成的医院制剂,此方源于南宋﹒洪遵《洪氏集验方》“水陆二仙丹”,由芡实、金樱子、黄连、大黄、黄芪、当归六味中药组成。方中芡实、金樱子补肾固涩为君,黄连、大黄清热解毒、降浊祛血瘀为臣,佐以黄芪、当归补气养血活血,诸药合用具有补肾降浊、解毒祛瘀之功效,适用于肾阳虚的DN患者。多年临床研究表明,固肾解毒方对DN疗效确切,可有效阻止早期DN发展到中晚期DN。而研制GSJD首要及关键步骤是其质量控制,药物具有良好的疗效也与质量控制的稳定、可靠紧密相关。本研究对其进行质量控制研究,以盐酸小檗碱的含量为考察指标,同时采用DN大鼠模型进一步评价质量控制稳定的可行性,旨在从质量控制和肾功能两方面综合评价。1.GSJD的质量控制研究采用薄层色谱法(Thin Layer Chromatography,TLC)及高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)对GSJD进行定性和定量研究,TLC鉴定GSJD中分别含有芡实、金樱子、黄芪、黄连、大黄、当归六味药材;HPLC定量测定其GSJD中盐酸小檗碱的含量,并进行方法学考察。薄层色谱结果显示,在相应的化合物的位置,显示相同颜色的斑点,分离效果均较好,结果稳定可靠;HPLC结果显示,GSJD的专属性结果良好,盐酸小檗碱在浓度为18.18~181.8μg/ml(r~2=0.9999)的范围内与峰面积呈现良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性的RSD均小于2%,平均加样回收率(n=6)为99.5%,RSD为1.4%,三批样品中盐酸小檗碱含量测定结果范围为8.87~9.63mg/粒,暂定每粒含盐酸小檗碱不得少于8.00 mg。2.GSJD改善DN大鼠肾功能研究本论文以GSJD对DN大鼠肾功能改善作用的研究,将大鼠随机分组为正常组和造模组,分别给予高脂饲料合并腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)以建立DN大鼠模型,正常组大鼠以3 ml/kg的剂量腹腔注射0.1 moL/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液;造模组则按30 mg/kg腹腔注射1%的STZ溶液(pH=4.2),72小时后尾尖采血检测空腹血糖,以血糖值高于11.1 mmoL/L做为糖尿病模型成功的标准,造模成功后的动物随机分为模型组、福辛普利组(阳性对照组)、GSJD低、中、高剂量组,分别给药8周,测定体重、血糖,24 h尿蛋白及相关血清生化指标并对肾脏病理组织结构进行检查、观察肾脏组织凋亡情况。结果显示GSJD对DN大鼠的体重及空腹血糖并未有明显的改善,但对其24小时尿中蛋白排泄量有明显的抑制作用,具有显著的统计学意义(P<0.05或P<0.001),且有明显的量效关系;对血清尿肌酐(Serum Creatinine,Scr)及血清尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)均有改善作用(P<0.05或P<0.001),且有明显的量效关系;病理结果显示GSJD对DN大鼠肾组织病理结构具有显著改善作用(P<0.05或P<0.001);肾脏组织凋亡情况观察结果显示GSJD对DN大鼠肾脏组织凋亡有改善作用。本研究通过TLC和HPLC法分别对GSJD进行定性、定量研究,质量控制结果稳定、可靠,为GSJD改善肾功能作用研究提供了安全性、有效性依据;研究GSJD对DN大鼠肾功能作用研究,从相关指标和肾脏病理结构检查、及肾脏组织细胞凋亡情况三方面结果表明对DN大鼠肾功能有改善作用。