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目的:探讨NLRP3(Nod-like receptor protein-3,NLRP3)炎症复合体在烟曲霉菌感染的人角膜上皮细胞中的作用,及其激活方式。方法:将研究对象设为体外培养的人永生化角膜细胞(HCECs)。本实验分为2部分。(1)以未加任何刺激的HCECs为空白对照组,以烟曲霉菌菌丝刺激的HCECs为实验组,在4、6、8、12、16h、24h用Real-time PCR法检测NLRP3、ASC、caspase-1m RNA,在8,16、24、36h时间点用Western Blot法检测NLRP3蛋白表达;(2)以体外培养的未加真菌刺激的HCECs为空白对照组,实验组细胞先加入不同浓度的格列本脲(Glyburide)预刺激两小时,然后加入烟曲霉菌菌丝刺激,在12小时时间点用real-time PCR法检测NLRP3 m RNA,在24小时时间点用Western Blot法检测NLRP3蛋白表达,在24小时时间点用ELISA法检测IL-1β蛋白表达。结果:(1)烟曲霉菌菌丝抗原刺激后可引起NLRP3、ASC、caspase-1基因水平表达量相对增高,时间依赖性,12h达到峰值;烟曲霉菌菌丝抗原刺激后可引起NLRP3蛋白水平表达量相对增高,呈时间依赖性,24h达到峰值;(2)在不同浓度的格列本脲抑制炎症小体的情况下,NLRP3基因表达量降低,并呈剂量依赖性,400m M为最佳刺激浓度;并且400m M格列本脲可使NLRP3和IL-1β蛋白表达量降低。其表达变化差异均有统计学意义。结论:在人类正常角膜上皮细胞中,存在NLRP3炎症小体,并且在烟曲霉菌菌丝刺激下,组成NLRP3炎症小体的各因子表达上升;在NLRP3炎症小体特异性抑制剂格列本脲(Glyburide)的抑制下,NLRP3和IL-1β基因和蛋白表达量降低,可以推测该小体在人角膜上皮细胞固有免疫中发挥重要作用。