目的：采用免疫组织化学染色方法，运用大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral arteryocclusion，MCAO）脑缺血模型，通过观察再灌注不同时间点缺血-再灌注组织CD8＋T细胞表达的动态变化，探讨CD8＋T细胞与缺血性脑损伤的关系。方法：健康成年雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠35只，体重250-300g，按随机原则分为假手术组，缺血再灌注24小时、3天、5天、7天、10天和14天组，每组5只。模型组参照Zea-Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）脑缺血模型。假手术组大鼠仅不插入线栓，其他操作同模型组。等待大鼠麻醉苏醒，于苏醒后24小时内按照Zea－Longa5分制评分法对其进行神经功能缺损评分，评分为1-3分的大鼠判定为造模成功，记录入选大鼠的分数。各组达再灌注时间点后（假手术组术后1天）断颈取脑，自脑前极始每2－2.5mm冠状切片，置入4%多聚甲醛液中外固定（至少24小时），避光保存。取固定好的组织，经流水过夜，梯度酒精脱水，二甲苯透明，浸腊（62度）和包埋过程，应用石蜡切片机每个蜡块连续切片3张，厚度4um制成石蜡切片。采用HE染色显示缺血-再灌注组织病理学形态；SP法免疫组织化学染色显示CD8分子表达的空间分布和时间变化，200倍光镜下每张切片目标区域（主要为缺血皮质）随机选取5个不重叠视野分别计数阳性细胞（阳性细胞的特征为胞膜棕黄染色），5个视野的平均值为该片阳性细胞计数结果。数码相机镜下拍照。结果：1.缺血-再灌注脑组织病理学观察:假手术组为正常脑组织，组织内细胞排列层次分明，神经元和神经胶质细胞形态结构正常。缺血-再灌注3天时缺血皮质组织结构紊乱，增厚，淡染，大量神经元水肿变性；再灌注7天时，缺血皮质中形态正常的神经元数量明显减少，大量神经元胞质胞核界限模糊、核固缩溶解，同时细胞间出现大小不等的空泡。中心坏死区出现大量空泡，呈蜂窝状，神经细胞少见；再灌注10天表现与7天相似。再灌注14天时缺血皮质空泡数量大量增加，坏死组织软化被清除。2.免疫组化观察CD8＋细胞分布：假手术组几乎无阳性表达。脑缺血再灌注24小时，缺血皮质即可观察到少量的CD8＋细胞；再灌注3天时众多CD8＋细胞弥漫分布于皮质梗死区缺血半暗带，细胞呈类圆形，大小略有差别，部分阳性细胞聚集在血管周围。随着时间的延长，CD8＋细胞数量逐渐增加，再灌注7-10天时最多，且表达部位逐渐转移到中心坏死区；再灌注14天时略有下降。3.高倍镜下CD8阳性细胞计数：假手术组为2.2±0.5个/HP；缺血再灌注24小时，3天，5天，7天，10天和14天组分别为6.4±1.6个/HP，18.5±1.1个/HP，21.8±2.3个/HP，26.4±1.8个/HP，25.9±2.2个/HP和23.7±1.2个/HP。各模型组阳性细胞数显著高于假手术组（P＜0.05）。结论：1.CD8+T细胞于缺血-再灌注24小时即开始表达，7-10天达到高峰，随后下降；2.CD8＋T细胞大量表达于缺血-再灌注脑组织，且主要分布于梗死区缺血半暗带；3.CD8＋T细胞参与了缺血脑组织的免疫炎症反应。