目的探讨液基细胞学（LCT）联合P16^INK4a和cyclin E在宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌早期诊断中的价值。方法对225例宫颈病变患者，采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）染色法，检测P16^INK4a和cyclin E在宫颈鳞状细胞癌（SCC）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、低度鳞状上皮内病变（LSIL）、不典型鳞状细胞（ASC）、正常范围（WNL）的LCT及石蜡标本组织切片中的表达，并对比传统的巴氏涂片、LCT、LCT联合P16^INK4a和cyclin E的病理诊断符和率。结果1．传统的巴氏涂片和LCT的比较LCT无一例不满意涂片，传统的巴氏涂片不满意率为12.44％（28／225）。225例病人中，传统的巴氏涂片的病理诊断符和率分别为LSIL49.38％（40／81），HSIL56.10％（23／41），SCC82.14％（46／56）。LCT的病理诊断符合率为LSIL52.63％（40／76），HSIL68.29％（28／41），SCC87.5％（49／56）；HSIL和SCC差异有显著性（X²=7.635，X²=8.157，P＜0.05）。LSIL组二者无明显差异（X²=3.142，P＞0.05）。传统的巴氏涂片细胞学诊断为ASC为17例，其活检或手术标本的病理诊断分别为正常13例，CINⅠ1例，CINⅡ-Ⅲ2例，SCC1例；LCT 32例ASC病理诊断分别为正常27例，CINⅠ2例，CINⅡ-Ⅲ2例，SCC1例。差异无显著性（X²=1.851，P＞0.05）。与巴氏涂片相比，LCT明显提高了HSIL和SCC的诊断率，但对于LSIL和ASC的诊断没有明显差异。2．P16^INK4a和cyclin E在宫颈癌的表达2．1 P16^INK4a的表达及LCT和LCT联合P16^INK4a的结果比较：所有病例中，P16^INK4a在正常宫颈细胞无着色。在56例SCC、35例HSIL、48例LSIL、32例ASC中P16^INK4a的阳性诊断符合率分别为89.29％（50／56），85.71％（30／35），68.75％（33／48），12.55％（4／32）；P16^INK4a的表达与SIL分级紧密相关。随SIL级别上升，P16^INK4a表达增加，在LSIL和HSIL之间，P16^INK4a的表达存在显著差异（X²=15.431，P＜0.05）。在正常与SIL和SCC之间，P16^INK4a的表达存在显著差异。（X²=33.637，X²=18.257，P＜0.05）。LCT联合P16^INK4a与单纯LCT比较：HSIL组，P=0.043；LSIL组，P=0.002；差异均有显著性；SCC组，P＞0.05，差异无显著性。2．2 cyclin E的表达及LCT和LCT联合cyclin E的结果比较在正常宫颈涂片未见有cyclin E的阳性表达；cyclin E的阳性诊断符合率分别为85.71％（48／56），74.29％（26／35），83.33％（40／48），9.38％（3／32）。在LSIL中，cyclin E的阳性率偏高，但和P16^INK4a不同，在LSIL和HSIL之间，cyclin E的表达无明显差异（X²=2.271，P＞0.05）；二者相同的是：病变越重，强阳性表达越明显。在正常和SIL与SCC三组中，cyclin E的表达有显著差异（X²=15.487，X²=17.382，P＜0.05）。LCT联合cyclin E与单纯LCT比较：LSIL组，P=0.000，差异有显著性。HSIL组，P=0.5，SCC组，P＞0.05，差异无显著性。LCT联合cyclin E明显提高了LSIL的诊断率。3．LCT和LCT联合P16^INK4a和cyclin E的结果比较单纯LCT的病理诊断符和率分别为LSIL52.63％，HSIL68.29％，SCC87.5％，LCT联合p16^INK4a和cyclin E的病理诊断符合率为LSIL87.50％，HSIL 88.57％，SCC91.07％；其中HSIL组，P=0.016；LSIL组，P=0.000；差异均有显著性。SCC组，P＞0.05，差异无显著性。32例ASC中，P16^INK4a呈强阳性表达者3例，病理诊断分别为中分化鳞癌1例，原位癌累及腺体1例，原位癌1例；其中cyclin E呈强阳性表达1例，阳性表达1例，阴性1例。病理诊断为CINⅠ的2例病例中，P16^INK4a和cyclin E都呈阳性表达1例。LCT联合P16^INK4a和cyclin E的阳性病理诊断符合率高达80％（4／5）。与单纯的LCT相比，LCT联合P16^INK4a和cyclin E对于ASC的诊断有较大价值。4．P16^INK4a和cyclin E在宫颈鳞癌的细胞学涂片和石蜡组织切片的表达比较56例鳞癌中，P16^INK4a和cyclin E在LCT的阳性表达分别为89.29％（50／56）和85.71％（48／56），在组织切片的表达分别为85.71％（48／56）和80.36％（45／56）。二者比较，无显著性差异，（X²=2.637，X²=2.815，P＞0.05）。结论1．LCT比传统的巴氏涂片有明显的优势。它不仅提供了足够量的标本，而且还改善了涂片的质量，使异常的上皮细胞很容易被辨认，大大提高了其阳性诊断率。用TBS分类系统作为诊断依据减少了主观影响，降低了假阳性率和假阴性率，对提高筛查的灵敏度和特异度具有重要意义。2．P16^INK4a的高表达与宫颈癌的发生发展有关。P16^INK4a的表达与SIL分级紧密相关。随SIL级别上升，P16^INK4a表达增加，在HSIL和宫颈癌呈强阳性表达。在正常对照组、SIL和鳞癌之间，P16^INK4a的表达存在显著差异。3．P16^INK4a和cyclin E协同参与宫颈癌的发展。cyclin E在LSIL、P16^INK4a在HSIL有较高的诊断符合率，二者联合可大大提高宫颈病变的诊断符合率；此外，二者在调控机理与途径上有着某种相似性，都参与了细胞周期调控。4．P16^INK4a可作为宫颈癌基因治疗的一个新靶点。因在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中都有高表达。5．LCT联合P16^INK4a和cyclin E可用于宫颈早期病变的筛查，尤其对于ASC的确诊，较单纯的LCT有更高的病理诊断符合率。此外，与组织学标本相比，采用液基细胞学制片检测P16^INK4a和cyclin E，取材方便、患者痛苦小，这一新方法值得推广。