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银杏聚戊烯醇类化合物包括游离聚戊烯醇(PPs)和聚戊烯醇乙酸酯(PPAs),是银杏叶中除类黄酮和萜内酯外的又一类重要次生代谢产物,对人类具有重要的药用和保健作用。目前关于银杏聚戊烯醇的研究主要集中在成分分析和含量测定上,对于其生物合成相关酶基因的克隆与表达尚未见研究。本文以银杏不同生长时期的叶片(5-10月份)以及不同组织器官(叶、花、果实和根)为材料,测定和分析各器官间PPs的含量,克隆银杏PPs合成的相关基因(CPT、PT、FPS),研究银杏PPs合成关键基因CPT的表达情况。主要研究结果如下：1、对银杏不同生长时期雌雄叶片中的PPs含量进行分析,发现在不同生长时期雌雄叶片中均可以检测到PPs的存在,其中雄叶的含量在320.92-1954.38μg·g-1FW之间,雌叶的含量在401.93-2291.67μg·g-1FW之间。2、对银杏雄株不同生长时期的幼叶和老叶的PPs含量进行分析,结果表明,幼叶的含量在480.30-1961.89μg·g-1FW之间,老叶的含量在320.92-1004.03μg·g-1Fw之间,不同时期均为幼叶高于老叶。3、对银杏不同器官间的PPs含量进行分析,发现不同器官均检测到PPs的存在,但含量不同。其中,根中的含量为35.73μg·g-1FW,花粉中的含量为58.05μg·g-1FW,均明显低于果实(545.31μg·g-1FW)和叶片(1389.62μg·g-1FW)4、以不同生长时期银杏雌株叶片为材料,比较了CTAB法、乙二醇丁醚法和改良Trizol法提取银杏叶片RNA的效果,结果表明改良Trizol法获得的RNA浓度和产率均较高,可满足后续分子生物学研究。5、根据不同植物顺式异戊烯基转移酶(CPT)基因的保守区序列,设计PCR引物,采用RT-PCR和RACE技术,以银杏叶片RNA为模板克隆获得1210bp的CPT基因全长cDNA。该基因789bp的开放阅读框(ORF)编码262个氨基酸,与其他植物CPT基因编码的氨基酸有较高的同源性,被命名为GbCPT, GeneBank登录号为JN108023。6、根据不同植物异戊烯基转移酶(PT)基因的保守区序列,设计PCR引物,采用RT-PCR和RACE技术,以银杏叶片RNA为模板克隆获得1646bp的PT基因全长cDNA。该基因750bp的ORF,编码249个氨基酸,与其他植物PT基因编码的氨基酸有较高的同源性,被命名为GbPT, GeneBank登录号为JQ303336。7、根据GenBank中其它植物法尼基焦磷酸合成酶(FPS)基因序列设计引物,以银杏叶片RNA为模板,采用3’-RACE方法扩增得到cDNA3’端部分序列。该cDNA3’端部分长701bp,包含一个316bp的ORF,3’端有385bp的非翻译区(UTR)并具有完整的PolyA尾巴,编码104个氨基酸,与其他植物FPS基因编码的氨基酸有较高的同源性,被命名为GbFPS, GeneBank登录号为JQ309808。8、对银杏不同器官CPT基因相对表达水平研究表明,CPT基因的表达水平与不同器官中PPs的合成与积累变化趋势一致,但不同发育时期叶片中CPT基因的表达水平与PPs的变化动态不一致。