大鼠脑线粒体的NO/NOS系统及其在脑缺血再灌注过程中的改变--脑缺血再灌注损伤机制的研究

来源 :北京医科大学 北京大学医学部 北京大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:coolboywcp
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该工作提纯了脑线粒体、建立了大鼠大脑中动脉阻塞的脑I/R线栓模型,在此基础上探讨了脑线粒体是否存在NO/NOS系统,以及在脑I/R过程中的动态变化,从而进一步研究脑I/R损伤的发病机制.采用Percoll密度梯度离心的方法纯化脑线粒体,发现得到的脑线粒体,其他亚细胞器污染可能忽略(仅为1%~5%),而且具有很高的功能(呼吸控制率=5~7).通过比较亚线粒体颗粒和纯化线粒体产生NO速率和用免疫杂交方法观察大鼠脑线粒体NOS(mtNOS),发现线粒体生成的NO是由线粒体内的eNOS催化产生的.在大鼠脑I/R模型上,于单纯缺血2h及再灌30min、2h、4h,分离纯化鼠脑线粒体,观察脑线粒体功能、其内NO的生成以及NOS活性和表达的变化.
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