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目的:
制备纳米级的Genistein-磁性微粒,考察Genistein-磁性纳米微粒(Genistein-magnetic-nanoparticles GEN-M-NPS)的理化性质,探讨GEN-M-NPS对人胃癌细胞株SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响。
方法:
1、采用乳化交联技术制备GEN-M-NPS,通过透射电镜观察微粒的形态和大小,紫外分光光度计测定GEN-M-NPS的载药量和包封率。
2、取对数生长期的人胃癌细胞株SGC-7901为实验对象,实验组分别给与不同浓度的(10、20、40、80、100μmol/L)GEN-M-NPS和Genistein,MTT法检测不同浓度药物对SGC-7901细胞作用24h,48h,72h的生长抑制效应。
3、流式细胞仪分析经不同浓度的GEN-M-NPS作用72h后的细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳观察GEN-M-NPS浓度为40μmol/L作用不同时间段的DNA片段化改变情况。
结果:
1、透射电镜观察GEN-M-NPS分布均匀,呈球形或椭圆形,具有良好的分散性,粒径约105nm;根据紫外分光光度计Genistein的吸光值计算GEN-M-NPS的载药量与包封率分别为17.28%和10.33%。
2、MTT结果显示GEN-M-NPS对SGC-7901细胞增殖有明显抑制作用,并呈剂量和时间依赖性。随剂量增加,48h抑制率由11.35%增至53.53%;随时间延长,抑制率由38.61%增至86.07%,与单药Genistein作用组相比,GEN-M-NPS具有缓释性(86.07% vs 67.11%,P<0.05)。
3、流式细胞仪检测不同浓度GEN-M-NPS作用72h后的细胞凋亡率分别是5.62%(10μmol/L)、13.46%(20μmol/L)、26.40%(40μmol/L)、37.34%(80μmol/L)、49.43%(100μmol/L),阴性对照组的凋亡率为2.60%;DNA凝胶电泳结果显示40μmol/L组作用24h可见明显的凋亡细胞形成的梯状条带。
结论:
Genistein制成磁性纳米微粒后,成球性好,但是载药量和包封率都不太高;体外细胞试验中,GEN-M-NPS能有效地抑制胃癌细胞增殖并诱导细胞凋亡,与Genistein相比,有缓释性。