索拉非尼对耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞治疗作用的实验研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wyt20070210
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目的:探讨索拉非尼对体外培养的耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞增殖、凋亡和侵袭的影响,为临床索拉非尼治疗耐顺铂的肺腺癌提供科学实验数据和理论依据。方法:常规体外培养耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞株,将加有空白培养液的细胞培养组设为对照组(S0组),将加有4个浓度梯度的索拉非尼的培养组分别设为4个实验组(分别为S1组:2μmol/L,S2组:4μmol/L,S3组:8μmol/L,S4组:16μmol/L),采用二苯基溴化四氮唑蓝(Mono-nuclear celldirect cytotoxicity assay, MTT)方法检测索拉非尼分别作用24、48、72h后的细胞生长抑制率,运用Annexin V-FITC凋亡试剂盒,流式细胞术(Flowcytometry,FCM)检测对照组和4个实验组72h的细胞凋亡率,并采用Transwell侵袭实验观察索拉非尼作用24h后对A549/DDP细胞侵袭力的影响。结果:MTT法检测显示:索拉非尼作用24h后S1组、S2组、S3组、S4组细胞抑制率分别为4.58±2.816%、14.93±2.620%、37.58±7.132%、58.39±8.148%;作用48h后相应各实验组抑制率分别为14.98±2.931%、26.28±7.308%、63.00±3.049%、78.84±3.956%;作用72h后相应各实验组抑制率分别为18.80±2.815%、32.71±2.547%、75.51±4.725%、87.50±3.361%,各实验组随着时间的延长,细胞抑制率逐渐提高,且各实验组在同一时间点随着药物浓度的增加,细胞抑制率也逐渐增高,其抑制作用具有时间与浓度依赖性(P均<0.05)。FCM检测显示:索拉非尼作用72h后,对照组凋亡率为8.88±0.81%,S1组、S2组、S3组、S4组细胞凋亡率分别12.84±0.24%、17.27±0.78%、21.98±0.75%、49.67±1.38%,各实验组凋亡率均高于对照组(P均<0.05),且各实验组之间的凋亡率差异具有统计学意义(P均<0.05),随浓度增高,凋亡率增加。Transwell实验检测显示:对照组穿膜细胞数为(82.7±2.3)个/HP。索拉非尼作用24h后,S1组、S2组、S3组、S4组平均穿膜细胞数分别为(58.2±2.5)/HP、(41.3±1.3)/HP、(22.6±2.1)/HP、(14.7±1.1)/HP,各实验组穿膜细胞数显著少于对照组(P均<0.05)。结论:索拉非尼能抑制耐顺铂肺腺癌A549/DDP细胞的增殖,其抑制作用具有时间与浓度依赖性,且索拉非尼还能诱导耐顺铂肺腺癌细胞的凋亡,并能降低A549/DDP细胞的侵袭力。
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