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目的:通过观察纯净水浴与石氏熏洗方药浴干预新西兰兔膝骨关节炎的大体观察评分、病理染色评分、X线影像学、股动脉血流动力学和关节液中的促炎性细胞因子、基质金属蛋白酶的蛋白含量与基因表达检测结果,探讨石氏熏洗方治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:(1)建立新西兰兔膝骨关节炎模型:20只新西兰兔随机分为模型组、sham组,每组10只;模型组进行木瓜蛋白酶注射,sham组进行假手术,造模4周后进行膝关节大体观察、X线影像学观察及滑膜病理观察。(2)筛选出对膝骨关节炎具有抑制和改善作用的有效纯净水浴温度:60只新西兰兔随机分为5组:高温组16只(按水温分为50℃、45℃和40℃三个亚组,每个亚组各5只,另有1只用于验证造模效果)、常温组16只(按水温分为35℃、30℃和25℃三个亚组,每个亚组各5只,另有1只用于验证造模效果)、低温组16只(按水温分为10℃、5℃和0℃三个亚组,每个亚组各5只,另有1只用于验证造模效果),模型组、sham组各6只;模型鉴定成功后,纯净水浴4周,再进行膝关节大体观察、X线影像学观察、滑膜病理观察、股动脉血流动力学检测,并采用ELISA法和RT-PCR法分别检测关节液中IL-1β、TNF-α、NF-κB、COX-2、NO、MMP-3、MMP-13 的蛋白含量和基因表达情况。(3)石氏熏洗方对新西兰兔膝骨关节炎的影响:50只新西兰兔随机分为5组:石氏熏洗方药浴组16只(按水温分为45℃、40℃和35℃三个亚组,每个亚组各5只,另有1只用于验证造模效果)、纯净水浴组16只(按水温分为45℃、40℃和35℃三个亚组,每个亚组各5只,另有1只用于验证造模效果),扶他林乳胶剂组、sham组、模型组各6只;模型鉴定成功后,分别采用石氏熏洗方及纯净水熏洗4周;再进行膝关节大体观察、X线影像学观察、滑膜病理观察、股动脉血流动力学检测,并采用ELISA法和RT-PCR法分别检测关节液中 IL-1β、TNF-α、NF-κB、COX-2、NO、MMP-3、MMP-13 的蛋白含量和基因表达情况。结果:(1)造模4周后,模型组膝关节周围结缔组织明显增生,关节液较混浊,量较多,软骨表面光泽欠佳,伴有大小、形态及深浅不一的缺损;sham组膝关节未见结缔组织增生,关节液较清亮,量适中,软骨表面光滑,无明显龟裂、磨损。滑膜病理观察:模型组有扁平滑膜细胞生成,滑膜细胞结构排列紊乱,可见较多炎性细胞浸润及少量微细血管扩张;sham组滑膜细胞无明显改变。X线影像学观察:模型组膝关节间隙变窄,有骨赘生成,关节面有缺损,周围软组织肿胀且密度增高;sham组膝关节无明显改变。(2)不同温度熏洗后,40℃亚组膝关节评分1.20±0.45分,优于其他干预组。滑膜病理观察:40℃亚组Mankins评分2.47±0.72分,优于其他干预组。X线影像学:高温组膝关节间隙改变及骨赘增生程度较常温组、低温组优。血流动力学:45℃亚组股动脉内径、血管阻力指数结果最优;40℃亚组收缩期、舒张期峰值流速结果最优。蛋白表达量:45℃亚组NF-κB、COX-2、NO及MMP-3蛋白表达结果最优;40℃亚组IL-1β、TNF-α、MMP-13蛋白表达结果最优。基因表达量:40℃亚组IL-1β、COX-2、NO、MMP-3、MMP-13结果最优;45℃亚组TNF-α、NF-κB表达结果最优。(3)药浴或水浴膝关节后,药浴40℃亚组膝关节评分1.73±0.57分,优于其他干预组。滑膜病理观察:药浴40℃亚组Mankins评分1.93±0.68分,优于其他干预组。X线影像学:石氏熏洗方药浴组膝关节间隙改变及骨赘增生程度纯净水浴组优,药浴40℃亚组与扶他林乳胶剂组表达结果近似。血流动力学:药浴40℃亚组股动脉内径、收缩期峰值流速、舒张期峰值流速结果最优,各组间血管阻力指数无明显差异。蛋白表达量:药浴40℃亚组TNF-α、COX-2蛋白表达结果较优,药浴45℃亚组IL-1β、NF-κB、NO、MMP-3、MMP-13蛋白表达结果较优。基因表达量:药浴40℃亚组IL-1β、COX-2、NO、MMP-3、MMP-13表达结果较优。药浴45℃亚组TNF-α、NF-κB表达结果较优。结论:(1)纯净水浴40℃是本实验温度梯度下治疗膝关节骨关节炎较为合适的干预温度;(2)石氏熏洗方40℃熏洗可以有效抑制新西兰兔膝关节滑膜组织中IL-1β、TNF-α、NF-κB、COX-2、NO、MMP-3、MMP-13 的蛋白含量和基因表达,继而有效治疗膝骨关节炎,改善膝骨关节炎患者的临床症状。