中药复方多糖的优化提取及其对小鼠免疫功能的影响

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环境恶劣和应激众多是集约化养殖场畜禽免疫力下降及疫病不断流行的主要因素,因此,提高畜禽的免疫力对于防控疾病有着重要的意义。免疫增强剂能够使免疫功能低下动物的细胞和体液免疫得到恢复和增强,具有广阔的开发和应用前景。目前临床上应用的生物性、化学性、营养性和细菌性的免疫增强剂中,很多都具有较好的佐剂活性,但也存在一些弊端,如药物残留和过敏反应等,因此筛选安全可靠、无药残、见效快的免疫增强剂成为当前畜牧业生产中急需解决的课题。中草药作为天然药物,其资源丰富、成本低廉,并且具有毒副作用小、无残留、不易产生抗药性等特点,成为免疫增强剂的首选。研究发现中草药中的多种成分可以影响机体的免疫调节,其中多糖是中药增强免疫的主要活性成分。多年来,中药化学与药理的研究多侧重于脂溶性化学成分,而忽视了中药多糖,往往将其当作杂质除去,这不仅是因为对其缺乏认识,更在于多糖的分离纯化比较困难。随着科技的发展,中药多糖的提取方法从当初的水煎剂法,发展到纤维素酶法、超声波提取法和超滤法等,各种方法的提取工艺不同,多糖的提取率也大相径庭,因此,摸索多糖高提取率的最佳工艺条件具有现实意义。本文利用正交试验设计研究了超声细胞粉碎法提取复方中药(黄芪:党参:茯苓:麦冬=4:2:2:1)多糖的最优条件,并将此最优条件下提取出的复方中药多糖配制成高、中、低三个浓度灌喂小鼠,以探讨其对小鼠免疫功能的影响及作用机理,同时,灌喂此复方中药的水煎剂作为对比,旨在研制高效、安全的中药免疫增强剂。选取200只体重相近的小鼠随机分成:生理盐水组(A组)、复方中药水煎剂(B组)、复方中药多糖低剂量组(C组)、复方中药多糖中剂量组(D组)和复方中药多糖高剂量组(E组),每组40只,每天每组0.3mL/只,连续灌喂7d。于第8d处死,进行免疫器官指数、细胞免疫、体液免疫和单核巨噬细胞吞噬指标的测定。结果显示:超声细胞粉碎法提取复方中药多糖的最优条件为:超声次数36次,超声功率为800W,料液比1:30。复方多糖提取率为6.602%,多糖含糖量为71.293%。与空白对照组和水煎剂组相比,超声细胞粉碎法最优条件下提取的复方中药多糖显著提高了小鼠的体液免疫和细胞免疫等相关参数,表明该复方中药多糖有增强小鼠免疫功能的作用。复方中药多糖高、中剂量对小鼠免疫功能的作用效果较好且基本相近,提示该复方多糖的免疫增强作用有最适浓度。从经济角度考虑,确定中等剂量为最优剂量。复方中药多糖急性毒性试验表明其毒性极低,临床应用安全,因此,本试验超声细胞粉碎法最优条件下提取的复方中药多糖作为免疫增强剂具有较大的开发和应用前景。
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